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一、范围
本标准规定了水质中粪大肠菌群的测定方法，适用于各种类型的水样品，包括自来水、地下水、河流水、湖泊水、海水、废水等。

二、引用标准
GB/T 601-2019 水质分析方法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室通用规范
GB/T 17219-1998 水质样品的制备
GB/T 5750.5-2006 水质检验 粪大肠菌群的测定
GB/T 17854-1999 水质样品的保存和运输

三、定义
3.1 粪大肠菌群
指肠道菌群中的大肠杆菌、菌属克雷伯氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、耶尔森氏菌等菌种的总称。

3.2 检出限
指在试验条件下，仪器检测的最小浓度。

3.3 粪大肠菌群总数
指水样中粪大肠菌群的总数。

四、仪器和试剂
4.1 仪器
紫外分光光度计、恒温水浴器、移液器、离心机、自动吸取器等。

4.2 试剂
4.2.1 无菌蒸馏水
4.2.2 无菌生理盐水
4.2.3 无菌培养基
4.2.4 无菌平板
4.2.5 无菌移液管
4.2.6 无菌吸管

五、样品采集和处理
5.1 样品采集
5.1.1 采集样品前，应先清洗容器，用蒸馏水冲洗3次，然后用无菌生理盐水冲洗3次，最后用样品采集容器采集样品。
5.1.2 采集样品时，应避免样品受到污染，应尽量避免空气接触。
5.1.3 采集样品时，应注意样品的保存时间，应尽快送到实验室进行分析。

5.2 样品处理
5.2.1 样品处理前，应先进行样品的混匀，然后取适量的样品进行处理。
5.2.2 样品处理时，应注意无菌操作，避免样品受到污染。

六、操作步骤
6.1 样品预处理
6.1.1 取适量的样品，加入等量的无菌生理盐水，混匀后，制备10倍稀释液。
6.1.2 取适量的10倍稀释液，加入等量的无菌生理盐水，混匀后，制备100倍稀释液。
6.1.3 取适量的100倍稀释液，加入等量的无菌生理盐水，混匀后，制备1000倍稀释液。

6.2 样品检测
6.2.1 取适量的1000倍稀释液，加入等量的无菌培养基，混匀后，倒入无菌平板中，用无菌移液管均匀涂布。
6.2.2 将涂布好的平板放入恒温水浴器中，温度为35℃，培养24小时。
6.2.3 取出培养好的平板，用紫外分光光度计测定菌落总数。

七、结果计算
7.1 计算公式
样品中粪大肠菌群总数（CFU/mL）=（菌落总数/取样量）×稀释倍数

7.2 计算要点
7.2.1 菌落总数应在30~300之间，如超出此范围，应重新进行检测。
7.2.2 如样品中菌落总数为0，则应进行下一级稀释液的检测，直至检测出菌落总数。

八、质量控制
8.1 仪器校准
8.1.1 紫外分光光度计应每天进行校准。
8.1.2 校准方法：用无菌蒸馏水进行校准，校准前应先进行零点校准。

8.2 平行样品
8.2.1 对同一样品进行两次检测，如结果相差不超过10%，则认为结果可靠。

九、报告内容
9.1 样品编号、名称、采样日期、采样地点、采样人员等信息。
9.2 检测结果，包括菌落总数、检出限等信息。
9.3 检测方法、仪器和试剂等信息。
9.4 检测人员和审核人员签名。

相关标准：
GB/T 601-2019 水质分析方法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室通用规范
GB/T 17219-1998 水质样品的制备
GB/T 5750.5-2006 水质检验 粪大肠菌群的测定
GB/T 17854-1999 水质样品的保存和运输