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大豆疫霉菌是一种常见的真菌,能够在大豆及其制品中生长繁殖,对人体健康造成威胁。因此,对大豆及其制品中的疫霉菌进行检测具有重要意义。本标准旨在规范大豆疫霉菌分子检测技术,确保检测结果准确可靠。
1.范围
本标准适用于大豆及其制品中疫霉菌的分子检测。
2.术语和定义
2.1 疫霉菌
指属于真菌门、疫霉科、疫霉属的一类真菌,包括黄曲霉、赤霉、青霉等多种菌种。
2.2 分子检测
指利用分子生物学技术对样品中的目标物进行检测的方法。
2.3 PCR
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是一种利用DNA聚合酶扩增DNA片段的技术。
2.4 实时荧光定量PCR
Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,是一种利用荧光探针实时监测PCR反应过程中DNA扩增量的技术。
3.要求
3.1 仪器设备
3.1.1 PCR仪
3.1.2 实时荧光定量PCR仪
3.1.3 DNA纯化仪
3.1.4 电泳仪
3.2 试剂和材料
3.2.1 DNA提取试剂盒
3.2.2 PCR试剂盒
3.2.3 荧光探针
3.2.4 DNA分子量标准品
3.2.5 纯化水
3.2.6 无菌吸头、离心管、PCR管、电泳仪用琼脂等
3.3 人员素质
3.3.1 具有分子生物学实验室操作经验的技术人员
3.3.2 熟练掌握PCR技术和实时荧光定量PCR技术的操作方法
4.方法
4.1 样品处理
4.1.1 样品的采集和保存应符合相关标准的要求。
4.1.2 样品的处理应避免污染和损伤。
4.2 DNA提取
4.2.1 根据DNA提取试剂盒的说明书进行操作。
4.2.2 提取的DNA应具有一定的纯度和浓度。
4.3 PCR扩增
4.3.1 根据PCR试剂盒的说明书进行操作。
4.3.2 PCR扩增条件应符合相关标准的要求。
4.4 实时荧光定量PCR检测
4.4.1 根据实时荧光定量PCR试剂盒的说明书进行操作。
4.4.2 实时荧光定量PCR检测条件应符合相关标准的要求。
4.5 结果判定
4.5.1 根据实时荧光定量PCR检测结果,判断样品中是否存在疫霉菌。
4.5.2 结果判定应符合相关标准的要求。
4.6 报告编制
4.6.1 报告应包括样品信息、检测结果、检测方法、检测人员等内容。
4.6.2 报告编制应符合相关标准的要求。
相关标准:
GB/T 5009.44-2017 食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法
GB/T 18979-2003 食品中真菌毒素的检验
GB/T 22388-2008 食品中真菌毒素的检测 酶联免疫法
GB/T 22387-2008 食品中真菌毒素的检测 液相色谱法
GB/T 22386-2008 食品中真菌毒素的检测 气相色谱法