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化妆品中的天然红4是一种常用的着色剂，其含量的测试对于保证化妆品的质量和安全具有重要意义。本标准旨在规定化妆品中天然红4含量的测试方法，以便于化妆品生产企业和监管部门进行检测和监管。

1.适用范围
本标准适用于化妆品中天然红4含量的测试。

2.测试原理
采用高效液相色谱法（HPLC）测定化妆品中天然红4的含量。

3.仪器设备
3.1 高效液相色谱仪
3.2 色谱柱：C18色谱柱
3.3 称量仪
3.4 超声波清洗仪
3.5 离心机

4.试剂和材料
4.1 天然红4标准品
4.2 甲醇
4.3 磷酸二氢钾
4.4 乙腈
4.5 纯水

5.样品的制备
5.1 取适量样品，精确称量。
5.2 加入甲醇，超声波清洗10分钟，离心10分钟，取上清液。
5.3 加入乙腈，超声波清洗10分钟，离心10分钟，取上清液。
5.4 用纯水稀释至适宜浓度。

6.操作步骤
6.1 标准曲线的制备
6.1.1 取天然红4标准品0.1mg/mL的甲醇溶液，稀释至0.01mg/mL、0.005mg/mL、0.0025mg/mL、0.00125mg/mL、0.000625mg/mL的五个浓度级别的溶液。
6.1.2 用HPLC测定各浓度级别的溶液的峰面积，绘制标准曲线。

6.2 样品的测试
6.2.1 用HPLC测定样品的峰面积。
6.2.2 根据标准曲线计算样品中天然红4的含量。

7.结果的计算
样品中天然红4的含量，按下式计算：
C=（As/A标准品）×C标准品×V样品/V标准品
其中，C为样品中天然红4的含量（mg/kg）；
As为样品中天然红4的峰面积；
A标准品为天然红4标准品的峰面积；
C标准品为天然红4标准品的浓度（mg/mL）；
V样品为样品的体积（mL）；
V标准品为标准品的体积（mL）。

8.精密度和准确度
8.1 精密度
在同一实验室内，重复测定6个样品，计算相对标准偏差（RSD），其值应小于10%。
8.2 准确度
在同一实验室内，测定3个不同浓度的标准品，计算相对误差（RE），其值应小于10%。

相关标准：
GB/T 2828.1-2012 采样程序的抽样计划、抽样方案和抽样程序的制定
GB/T 2829-2002 检验抽样程序及表观缺陷抽样计划的制定
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
GB/T 191-2008 化学分析方法通用规定
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