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一、范围
本标准适用于柑橘属果实中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 6688 分析化学实验室安全操作规程
GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
GB/T 13610 化学试剂通用技术条件
GB/T 14675 液体色谱分析通用条件

三、原理
样品经乙醇提取后，经过C18柱净化，用高效液相色谱法进行分离，检测波长为280nm，采用外标法定量。

四、仪器和设备
1.高效液相色谱仪
2.电子天平
3.超声波清洗器
4.恒温水浴器
5.pH计

五、试剂和材料
1.甲醇（色谱纯）
2.乙醇（色谱纯）
3.磷酸二氢钾（AR）
4.磷酸氢二钠（AR）
5.柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷标准品（纯度≥98%）

六、操作步骤
1.样品制备
取适量样品，去皮、去籽，切碎，加入乙醇，超声提取，离心，取上清液，用乙醇定容至刻度，过滤。
2.色谱条件
色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）
流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（30:70）
流速：1.0mL/min
检测波长：280nm
进样量：20μL
3.标准曲线的绘制
取柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷标准品，分别制成不同浓度的标准溶液，用高效液相色谱法测定，绘制标准曲线。
4.样品测定
取适量样品，用高效液相色谱法测定，根据标准曲线计算柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量。

七、结果计算
样品中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量，按下式计算：
C=（A-B）/a×V/m
其中，C为柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量（mg/kg）；
A为样品峰面积；
B为空白峰面积；
a为标准曲线斜率；
V为样品提取液的体积（mL）；
m为样品质量（g）。

八、精密度和准确度
在同一实验室内，重复测定某一样品6次，计算相对标准偏差（RSD），RSD不大于5%。

九、质量控制
1.每批样品应设置空白样品和质控样品，质控样品应包括低、中、高3个浓度水平。
2.质控样品的测定结果应符合以下要求：
低浓度水平：相对误差（RE）不大于±15%
中浓度水平：RE不大于±10%
高浓度水平：RE不大于±5%

相关标准：
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 6688 分析化学实验室安全操作规程
GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
GB/T 13610 化学试剂通用技术条件
GB/T 14675 液体色谱分析通用条件