DB35/T 1560-2016
柚实雷瘿蚊检疫鉴定方法
发布时间:2016-04-06 实施时间:2016-07-06
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柚实雷瘿蚊是一种病媒蚊,能够传播登革热、寨卡病毒等多种疾病,对人类健康造成威胁。为了防止柚实雷瘿蚊的传播,需要对其进行检疫鉴定。本标准规定了柚实雷瘿蚊检疫鉴定方法,具体步骤如下:
1. 样品采集
样品采集应在柚实雷瘿蚊活动的季节进行,采集地点应选择可能存在柚实雷瘿蚊的地区,如温室、花园等。采集的样品包括蚊子、蚊卵、蚊幼虫等。
2. 样品处理
将采集的样品放入离心管中,加入适量的PBS缓冲液,离心沉淀。将上清液倒掉,留下沉淀。加入适量的蛋白酶K,室温下消化1小时。加入适量的SDS,室温下振荡1小时。加入适量的异丙醇,室温下振荡1小时。离心沉淀,将上清液倒掉,留下沉淀。
3. PCR扩增
将样品沉淀加入PCR反应管中,加入适量的PCR试剂,进行PCR扩增。PCR反应条件为:95℃预变性5分钟,95℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸30秒,共35个循环。PCR扩增产物应保存在-20℃以下。
4. PCR产物检测
将PCR扩增产物加入琼脂糖凝胶中,进行电泳检测。检测结果应根据PCR扩增产物的大小和电泳图谱确定。
本标准的实施可以有效地检测柚实雷瘿蚊,防止其传播,保障人类健康。
相关标准:
GB/T 2828.1-2012 采样检验程序 第1部分:按比例抽样检验程序
GB/T 2829-2002 采样检验程序 抽样表的制定和使用
GB/T 14233.1-2008 检验规范 第1部分:检验的一般规定
GB/T 14233.2-2005 检验规范 第2部分:检验员的资格和职责
GB/T 14233.3-2005 检验规范 第3部分:检验机构的管理要求