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猪瘟病毒是一种高度传染性的病毒，能够引起猪的严重疾病，对养猪业造成了很大的经济损失。因此，对猪瘟病毒的检测非常重要。本标准旨在规定猪瘟病毒抗体高敏荧光检测试剂卡的制备及高敏荧光免疫分析操作规程，以保证检测结果的准确性和可靠性。

1. 荧光素标记抗体的制备
1.1 材料准备
1.1.1 荧光素标记抗体
1.1.2 蛋白质定量试剂盒
1.1.3 荧光素标记试剂盒
1.1.4 磷酸盐缓冲液（PBS）
1.1.5 甲醛
1.1.6 甲醛缓冲液
1.1.7 甲醛去除液
1.1.8 磷酸盐缓冲液（PBST）
1.1.9 甲醛去除液

1.2 制备步骤
1.2.1 将荧光素标记抗体加入PBS中，使其浓度为1mg/mL。
1.2.2 用蛋白质定量试剂盒测定荧光素标记抗体的浓度。
1.2.3 将荧光素标记试剂盒中的荧光素标记试剂加入荧光素标记抗体中，使其浓度为1mg/mL。
1.2.4 在甲醛缓冲液中加入甲醛，使其浓度为0.5%。
1.2.5 将荧光素标记抗体加入甲醛缓冲液中，使其浓度为0.1mg/mL。
1.2.6 在室温下搅拌反应30分钟。
1.2.7 加入甲醛去除液，停止反应。
1.2.8 用PBST洗涤荧光素标记抗体，去除未反应的甲醛。

2. 猪瘟病毒抗体高敏荧光检测试剂卡的制备
2.1 材料准备
2.1.1 荧光素标记抗体
2.1.2 猪瘟病毒抗原
2.1.3 磷酸盐缓冲液（PBS）
2.1.4 96孔微孔板
2.1.5 洗板液
2.1.6 阻断液
2.1.7 标准品
2.1.8 检测样品

2.2 制备步骤
2.2.1 将猪瘟病毒抗原加入PBS中，使其浓度为1mg/mL。
2.2.2 在96孔微孔板中加入猪瘟病毒抗原，使其浓度为0.1mg/mL。
2.2.3 在每个孔中加入100μL荧光素标记抗体，使其浓度为0.1mg/mL。
2.2.4 在每个孔中加入100μL标准品或检测样品。
2.2.5 在37℃下孵育1小时。
2.2.6 用洗板液洗涤孔板。
2.2.7 在每个孔中加入100μL阻断液。
2.2.8 在37℃下孵育30分钟。
2.2.9 用洗板液洗涤孔板。
2.2.10 在每个孔中加入100μL荧光素标记试剂。
2.2.11 在37℃下孵育30分钟。
2.2.12 用洗板液洗涤孔板。
2.2.13 在每个孔中加入100μL显色底物。
2.2.14 在室温下避光孵育30分钟。
2.2.15 在每个孔中加入100μL终止液。
2.2.16 用荧光分析仪读取荧光值。

相关标准：
GB/T 22470-2008 猪瘟病毒抗体检测方法
GB/T 22471-2008 猪瘟病毒抗体检测试剂盒
GB/T 22472-2008 猪瘟病毒抗原检测方法
GB/T 22473-2008 猪瘟病毒抗原检测试剂盒
GB/T 22474-2008 猪瘟病毒检测方法