DB34/T 2560-2015
窖泥微生物群落结构快速定量测定 PSP-qPCR绝对定量法
发布时间:2015-12-30 实施时间:2016-01-30


窖泥微生物群落结构是指在窖泥中存在的各种微生物种类及其数量的组成。窖泥微生物群落结构的研究对于窖泥的生态环境评价、窖泥处理工艺的优化以及窖泥中有益微生物的筛选等方面具有重要意义。传统的窖泥微生物群落结构分析方法需要进行培养和鉴定,耗时耗力,且无法检测到未被培养的微生物种类。因此,开发一种快速、准确、可靠的窖泥微生物群落结构分析方法具有重要的现实意义。

PSP-qPCR是一种基于荧光探针的PCR技术,可以快速、准确地检测窖泥中的微生物种类及其数量。该技术利用特异性引物和荧光探针,可以在PCR反应中同时检测多个微生物种类的DNA,从而实现对窖泥微生物群落结构的快速定量测定。

本标准规定了窖泥微生物群落结构快速定量测定PSP-qPCR绝对定量法的技术要求、试验方法、结果计算及报告。具体内容如下:

1. 技术要求
1.1 PSP-qPCR仪器:应具有高灵敏度、高特异性、高准确性和高重复性。
1.2 试剂盒:应具有高特异性、高灵敏度、高稳定性和高重复性。
1.3 标准品:应具有高纯度、高浓度、高稳定性和高可重复性。

2. 试验方法
2.1 样品采集:应按照规定的方法采集窖泥样品,并进行处理和保存。
2.2 DNA提取:应按照规定的方法提取窖泥中的总DNA。
2.3 PSP-qPCR反应:应按照规定的方法进行PSP-qPCR反应,并记录荧光信号。
2.4 标准曲线绘制:应按照规定的方法绘制标准曲线,并计算样品中微生物的绝对数量。
2.5 数据分析:应按照规定的方法对数据进行分析,并生成报告。

3. 结果计算及报告
3.1 样品中微生物的绝对数量应按照规定的方法计算,并在报告中列出。
3.2 报告应包括样品信息、实验方法、结果计算及分析、结论等内容。

相关标准:
1. GB/T 4789.2-2016 食品微生物学检验 第2部分:肠道致病菌检验
2. GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 第3部分:耐热芽孢杆菌检验
3. GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 第4部分:大肠埃希菌检验
4. GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 第5部分:沙门氏菌检验
5. GB/T 4789.10-2016 食品微生物学检验 第10部分:真菌和酵母菌检验