DB34/T 2795-2016
猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒二重 RT-PCR 检测方法
发布时间:2016-12-30 实施时间:2017-01-30


猪传染性胃肠炎病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪流行性腹泻病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是猪的重要病原体,能引起猪的严重胃肠炎症状,导致猪的死亡率高达90%。为了及时、准确地检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒,保障猪的健康和养殖业的发展,制定了[DB34/T 2795-2016][猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒二重 RT-PCR 检测方法]标准。

该标准规定了猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二重 RT-PCR 检测方法的要求、试剂盒的组成、操作步骤、结果判定及质量控制等内容。具体如下:

1. 要求
本标准适用于猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒的二重 RT-PCR 检测。

2. 试剂盒的组成
试剂盒应包括病毒 RNA 提取试剂盒、RT-PCR 试剂盒、阳性对照品、负性对照品等。

3. 操作步骤
(1)样品处理:将样品加入病毒 RNA 提取试剂盒中,提取病毒 RNA。
(2)RT-PCR 反应:将提取的病毒 RNA 加入 RT-PCR 试剂盒中,进行 RT-PCR 反应。
(3)结果分析:根据 RT-PCR 反应结果,判断样品中是否存在猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒。

4. 结果判定
(1)阳性结果:同时检测到猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒的特异性条带。
(2)阴性结果:未检测到猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒的特异性条带。
(3)无效结果:未检测到内参条带或阳性对照品未出现特异性条带。

5. 质量控制
(1)阳性对照品应在每次检测中同时进行检测。
(2)负性对照品应在每次检测中同时进行检测。
(3)内参应在每次检测中同时进行检测。

相关标准:
1. GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
2. GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 大肠杆菌检验
3. GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 菌落总数和酵母菌、霉菌计数检验
4. GB/T 4789.7-2016 食品微生物学检验 肠球菌属检验
5. GB/T 4789.38-2016 食品微生物学检验 耐热性芽孢杆菌检验