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副猪嗜血杆菌是一种常见的猪源性细菌，可引起猪链球菌病，对猪养殖业造成严重危害。为了更好地了解副猪嗜血杆菌的分布和流行情况，需要对其进行分子分型。本标准介绍了一种常用的副猪嗜血杆菌分子分型方法——MLST方法。

MLST方法是一种基于多个基因序列的分子分型方法，可以对细菌进行高分辨率的分型。该方法通过对多个基因的序列进行测序和分析，得到每个基因的不同等位基因序列，然后将这些序列组合起来，形成一个多位点序列类型（ST）。不同的ST代表不同的细菌亚型，可以用于研究细菌的种群结构、流行病学和进化等问题。

本标准规定了副猪嗜血杆菌的MLST方法，包括以下步骤：

1. 样品采集：采集副猪嗜血杆菌阳性的猪肠道、淋巴结、肺、脾等组织或分泌物样品。

2. DNA提取：使用适当的DNA提取试剂盒或方法，从样品中提取细菌DNA。

3. PCR扩增：使用特异性引物，对7个基因（adk、fumC、gyrB、mdh、purA、recA、sodA）进行PCR扩增。

4. 测序：将PCR产物进行双向测序，得到每个基因的序列。

5. 序列分析：使用相应的软件，对每个基因的序列进行比对和分析，得到每个基因的不同等位基因序列。

6. 数据分析：将7个基因的等位基因序列组合起来，形成一个多位点序列类型（ST），并将其与已知的ST进行比对，确定其亚型。

本标准还规定了实验室质量控制、数据管理和结果解释等方面的要求。

相关标准：
GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 副猪嗜血杆菌检验方法
GB/T 22470.1-2008 生物技术实验室质量管理体系 第1部分：通用要求
GB/T 22470.2-2008 生物技术实验室质量管理体系 第2部分：实验室能力验证
GB/T 22470.3-2008 生物技术实验室质量管理体系 第3部分：实验室内质量控制
GB/T 22470.4-2008 生物技术实验室质量管理体系 第4部分：实验室数据管理