一、范围
本标准适用于水产品中孔雀石绿残留的检测。

二、检测原理
本方法采用胶体金免疫层析法，利用孔雀石绿与特异性单克隆抗体结合，形成复合物，经过胶体金标记的二抗识别，形成红色条带，根据条带颜色的强弱判断样品中孔雀石绿残留的含量。

三、试剂和仪器
1. 孔雀石绿单克隆抗体试剂盒
2. 胶体金标记的二抗试剂盒
3. 样品处理试剂盒
4. 96孔板
5. 微量移液器
6. 显色剂
7. 读板器

四、样品处理
1. 取样品10g，加入50mL甲醇，振荡30min，离心10min，取上清液备用。
2. 取上清液1mL，加入样品处理试剂盒中，振荡1min，离心10min，取上清液备用。

五、操作步骤
1. 取出试剂盒，将所有试剂平衡至室温。
2. 取出96孔板，标注样品编号。
3. 取出孔雀石绿单克隆抗体试剂盒，将试剂A加入96孔板中，每孔100μL。
4. 取出样品处理试剂盒，将处理后的样品加入96孔板中，每孔100μL。
5. 将96孔板振荡1min，孵育30min。
6. 取出胶体金标记的二抗试剂盒，将试剂B加入96孔板中，每孔100μL。
7. 将96孔板振荡1min，孵育30min。
8. 取出显色剂，将显色剂加入96孔板中，每孔100μL。
9. 将96孔板振荡1min，孵育10min。
10. 取出读板器，读取96孔板中每孔的OD值。

六、结果判定
1. 根据读板器中每孔的OD值，判断样品中孔雀石绿残留的含量。
2. OD值小于0.1为阴性，大于等于0.1为阳性。

七、质量控制
1. 本方法采用内标法进行质量控制。
2. 每批样品中加入内标样品，判断检测结果的准确性和可靠性。

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2. GB 31604.2-2016 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
3. GB 31604.3-2016 食品安全国家标准 食品中食品添加剂使用标准
4. GB 31604.4-2016 食品安全国家标准 食品中重金属限量
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