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一、范围
本标准适用于动物尿液中FB1的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水质量规格和评价方法
GB/T 6688 分析化学实验室安全操作规程
GB/T 20394.1 食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法 第1部分：总体系
GB/T 20394.2 食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法 第2部分：液相色谱-串联质谱法
GB/T 20394.3 食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法 第3部分：液相色谱-荧光检测法

三、原理
将动物尿液样品经过柱前衍生化处理，使FB1转化为易于检测的衍生物，然后采用高效液相色谱法进行分离和检测。

四、仪器和设备
1.高效液相色谱仪
2.分析天平
3.移液器
4.离心机
5.超声波清洗器
6.1 mL量筒
7.1 mL注射器
8.毛细管
9.氮气吹扫仪

五、试剂和材料
1.甲醇
2.氯仿
3.乙酸乙酯
4.氢氧化钠
5.硼酸
6.硫酸
7.氯化铵
8.氯化钠
9.氯化钾
10.柠檬酸
11.乙酸
12.乙酸钠
13.乙酸乙酯
14.氯甲酸乙酯
15.三氯乙酸
16.氯化钠
17.水
18.动物尿液样品

六、操作步骤
1.样品制备
取动物尿液样品10 mL，加入10 mL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，加入等体积的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，将上层液体转移到1 mL离心管中，加入等体积的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯甲酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的三氯乙酸，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的氯仿，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的乙酸乙酯，振荡混合5 min，离心10 min，取上层液体，用氮气吹干，加入100 μL的甲醇，振荡混合5 min，离心10 min，