硝基呋喃类代谢物是一类常见的食品污染物，对人体健康有一定的危害。因此，对水产品中硝基呋喃类代谢物的残留量进行检测具有重要的意义。本标准采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行检测，具有灵敏度高、准确度高、操作简便等优点。

1. 适用范围
本标准适用于水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定。

2. 仪器和试剂
2.1 酶标仪：具有450nm波长滤光片的酶标仪。
2.2 微孔板洗涤器：自动微孔板洗涤器。
2.3 微孔板读板器：具有450nm波长滤光片的微孔板读板器。
2.4 微孔板：96孔微孔板。
2.5 试剂盒：硝基呋喃类代谢物检测试剂盒。

3. 样品处理
3.1 样品的准备：将样品取适量，加入等体积的甲醇，振荡混合，离心沉淀，取上清液进行检测。
3.2 样品的稀释：将上述上清液稀释至适宜浓度。

4. 操作步骤
4.1 取出所需的微孔板，标注样品编号和对应的标准品浓度。
4.2 加样：将稀释后的样品加入微孔板中，每孔加入100μL。
4.3 加标准品：将标准品加入微孔板中，每孔加入100μL。
4.4 加酶标记抗体：将酶标记抗体加入微孔板中，每孔加入100μL。
4.5 混匀：轻轻振荡混匀，避免产生气泡。
4.6 孵育：在37℃恒温箱中孵育30分钟。
4.7 洗板：将微孔板放入微孔板洗涤器中，用洗涤缓冲液洗板3次。
4.8 加底物：将底物加入微孔板中，每孔加入100μL。
4.9 孵育：在37℃恒温箱中孵育15分钟。
4.10 加停止液：将停止液加入微孔板中，每孔加入50μL。
4.11 读板：将微孔板放入微孔板读板器中，读取吸光度值。

5. 结果计算
5.1 标准曲线的绘制：将标准品的吸光度值绘制成曲线，计算出样品中硝基呋喃类代谢物的浓度。
5.2 样品中硝基呋喃类代谢物的浓度计算：根据样品的吸光度值和标准曲线计算出样品中硝基呋喃类代谢物的浓度。

相关标准
GB 31604.29-2016 食品安全国家标准 食品中硝基呋喃类代谢物的测定 气相色谱-质谱法
GB/T 5009.155-2016 食品中硝基呋喃类代谢物的测定 高效液相色谱法
GB/T 31604.29-2016 食品中硝基呋喃类代谢物的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 31604.30-2016 食品中硝基呋喃类代谢物的测定 液相色谱-紫外检测法
GB/T 31604.31-2016 食品中硝基呋喃类代谢物的测定 液相色谱-荧光检测法