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鸭肝炎病毒是一种常见的家禽病毒,能够引起鸭、鹅等家禽的肝脏病变。为了及时发现和控制鸭肝炎病毒的传播,需要对其进行快速、准确的检测。本标准提供了一种双重RT-PCR检测方法,可以同时检测鸭肝炎病毒1型和3型。
1. 范围
本标准适用于鸭肝炎病毒1型和3型的检测。
2. 规定
2.1 试剂和设备
2.1.1 RNA提取试剂盒
2.1.2 反转录试剂盒
2.1.3 PCR试剂盒
2.1.4 PCR仪
2.1.5 离心机
2.1.6 紫外分光光度计
2.1.7 电泳仪
2.2 操作步骤
2.2.1 样品处理
将样品(肝脏、血液等)加入RNA提取试剂盒中,按照说明书提取RNA。
2.2.2 反转录
将RNA加入反转录试剂盒中,按照说明书进行反转录。
2.2.3 PCR扩增
将反转录产物加入PCR试剂盒中,按照说明书进行PCR扩增。
2.2.4 电泳检测
将PCR产物进行电泳检测,根据产物大小判断是否存在鸭肝炎病毒1型和3型。
2.3 结果判定
2.3.1 如果PCR产物大小为约400bp,则判定为鸭肝炎病毒1型阳性。
2.3.2 如果PCR产物大小为约600bp,则判定为鸭肝炎病毒3型阳性。
2.3.3 如果PCR产物大小为约400bp和600bp,则判定为鸭肝炎病毒1型和3型双重阳性。
2.3.4 如果PCR产物大小为其他大小,则判定为阴性。
相关标准:
GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 检验和鉴定家禽肝炎病毒
GB/T 22470-2008 家禽病毒性疾病防治技术规范
GB/T 22471-2008 家禽病毒性疾病诊断技术规范
GB/T 22472-2008 家禽病毒性疾病疫苗生产技术规范
GB/T 22473-2008 家禽病毒性疾病疫苗检验技术规范