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一、范围
本标准适用于食品中合成着色剂的固相萃取-高效液相色谱法检测。

二、方法概述
样品经乙醇提取后，使用固相萃取柱进行富集，再用高效液相色谱法进行分析。

三、仪器和设备
1.高效液相色谱仪
2.固相萃取柱
3.电子天平
4.移液器
5.离心机
6.超声波清洗仪

四、试剂和材料
1.甲醇
2.乙醇
3.水
4.乙腈
5.氯化钠
6.硫酸
7.氢氧化钠
8.硝酸钠
9.硝酸银
10.硫酸铜
11.硫酸铵
12.氯仿
13.乙酸乙酯
14.氯仿-乙酸乙酯（1:1，V/V）

五、样品处理
1.样品准备：将样品称取5g，加入50mL乙醇中，超声处理10min，离心10min，取上清液备用。
2.固相萃取柱处理：将样品上清液通过固相萃取柱，用甲醇-水（1:1，V/V）洗脱，收集洗脱液，旋干后加入5mL乙腈中，超声处理10min，离心10min，取上清液备用。

六、色谱条件
1.色谱柱：C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）
2.流动相：A相为0.1%甲酸水溶液，B相为乙腈
3.梯度洗脱程序：0-5min，10% B；5-15min，10%-50% B；15-25min，50%-90% B；25-30min，90% B；30-35min，90%-10% B；35-40min，10% B
4.流速：1.0mL/min
5.检测波长：根据不同的合成着色剂选择不同的波长

七、结果计算
根据标准曲线计算样品中合成着色剂的含量。

八、质量控制
1.样品平行实验：每个样品进行3次平行实验，计算平均值。
2.质控样品：每个批次样品中加入质控样品，计算回收率和相对标准偏差。

相关标准：
1. GB 5009.60-2016 食品中合成着色剂的测定
2. GB/T 18979-2003 食品中合成着色剂的高效液相色谱法
3. GB/T 5009.156-2016 食品中合成着色剂的固相萃取-高效液相色谱法
4. GB/T 5009.159-2016 食品中合成着色剂的气相色谱法
5. GB/T 5009.161-2016 食品中合成着色剂的液相色谱-串联质谱法