DB33/T 963-2015
厚皮甜瓜种子纯度分子标记鉴定方法
发布时间:2015-05-07 实施时间:2015-06-07
厚皮甜瓜是一种重要的经济作物,其种子纯度的高低直接影响到种子的质量和产量。传统的种子纯度检测方法主要是通过人工观察种子外观和形态来判断,这种方法存在主观性强、误差大等缺点。随着分子生物学技术的发展,利用分子标记技术对种子纯度进行鉴定已成为一种可靠、快速、准确的方法。
本标准主要包括以下步骤:
1. 样品的采集:从不同的厚皮甜瓜品种中随机采集种子样品,每个品种采集不少于30粒种子。
2. DNA提取:将采集的种子样品进行粉碎,提取其中的DNA。本标准推荐使用CTAB法进行DNA提取。
3. PCR扩增:利用特异性引物对DNA进行PCR扩增,扩增条件为:94℃预变性5min,94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环,最后72℃延伸10min。
4. 电泳分析:将PCR扩增产物进行电泳分析,分析条件为:电压120V,电泳时间40min,电泳缓冲液为TBE缓冲液。
通过电泳分析,可以得到不同品种厚皮甜瓜种子的DNA条带图谱,根据条带图谱可以判断种子的纯度。
本标准的实施可以提高厚皮甜瓜种子纯度的检测效率和准确性,为种子生产和质量控制提供科学依据。
相关标准
GB/T 16159-2012 厚皮甜瓜种子
GB/T 17215.3-2007 植物种子质量检验方法 第3部分:种子纯度检验
GB/T 17215.4-2007 植物种子质量检验方法 第4部分:种子杂质检验
GB/T 17215.5-2007 植物种子质量检验方法 第5部分:种子水分检验
GB/T 17215.6-2007 植物种子质量检验方法 第6部分:种子萌发力检验