β-胡萝卜素是一种重要的营养素，对动物的生长发育和健康具有重要作用。因此，对饲料中β-胡萝卜素的测定具有重要意义。本标准采用高效液相色谱法进行测定，具有准确、快速、灵敏度高等优点。

1. 原理
样品经提取后，经过色谱柱分离，利用高效液相色谱法进行检测。本方法采用C18色谱柱，以甲醇-水（95:5）为流动相，检测波长为450nm。

2. 仪器和设备
（1）高效液相色谱仪
（2）色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm
（3）移液器、量筒、瓶塞、滤膜等

3. 试剂和材料
（1）甲醇（色谱纯）
（2）水（色谱纯）
（3）β-胡萝卜素标准品
（4）饲料样品

4. 操作步骤
（1）样品制备：取适量饲料样品，粉碎后称取1g，加入10mL甲醇，超声提取30min，离心10min，取上清液过滤。
（2）色谱条件：流速1.0mL/min，柱温25℃，检测波长450nm。
（3）标准曲线制备：取β-胡萝卜素标准品，分别加入甲醇中制备不同浓度的标准溶液，以0.45μm滤膜过滤。
（4）样品检测：取适量上清液，以同样的方法制备样品溶液，注入高效液相色谱仪进行检测。
（5）计算：根据标准曲线计算样品中β-胡萝卜素的含量。

5. 结果计算
样品中β-胡萝卜素的含量（mg/kg）=（样品峰面积/标准品峰面积）×标准品浓度×稀释倍数

6. 精密度和准确度
本方法的精密度和准确度符合实验室要求。

相关标准
GB/T 6434-2018 饲料中β-胡萝卜素的测定 高效液相色谱法
GB/T 6435-2018 饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法
GB/T 6436-2018 饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法
GB/T 6437-2018 饲料中维生素D3的测定 高效液相色谱法
GB/T 6438-2018 饲料中维生素K3的测定 高效液相色谱法