虾肝肠胞虫是一种常见的寄生虫,会引起虾类动物的肝肠病变,严重影响虾类养殖业的发展。因此,对虾肝肠胞虫的检测显得尤为重要。目前,虾肝肠胞虫的检测方法主要包括显微镜检测和PCR检测。其中,PCR检测具有高灵敏度、高特异性、快速、简便等优点,已成为虾肝肠胞虫检测的主要方法之一。
为了规范虾肝肠胞虫核酸检测技术,保证检测结果的准确性和可靠性,国家海洋局于2022年发布了DB33/T 2492-2022虾肝肠胞虫核酸检测技术规范。该标准主要包括以下内容:
1.样品采集
样品采集应在虾类动物死亡后24小时内进行,采集的样品应包括虾肝、肠、胃等部位。采集后应立即放入离心管中,并在-80℃以下保存。
2.核酸提取
核酸提取应在无菌条件下进行,提取的核酸应具有高纯度和高质量。常用的核酸提取方法包括酚-氯仿法、磁珠法、硅胶柱法等。
3.PCR扩增
PCR扩增应在无菌条件下进行,扩增反应体系应包括模板DNA、引物、酶、缓冲液等。PCR扩增条件应根据引物设计和实验室条件进行优化。
4.检测结果判定
PCR扩增产物应进行凝胶电泳检测,检测结果应根据扩增产物的大小和数量进行判定。同时,应设置阳性对照和阴性对照,确保检测结果的准确性和可靠性。
相关标准
GB/T 4789.33-2016 食品微生物学检验 河流、湖泊、水库水和底泥中寄生虫的检验
GB/T 4789.34-2016 食品微生物学检验 海水中寄生虫的检验
GB/T 4789.35-2016 食品微生物学检验 淡水养殖水产品中寄生虫的检验
GB/T 4789.36-2016 食品微生物学检验 海水养殖水产品中寄生虫的检验
GB/T 4789.37-2016 食品微生物学检验 淡水养殖水和海水养殖水中寄生虫卵的检验