青霉素是一种广泛应用于畜牧业的抗生素，但其残留量会对人体健康造成威胁。因此，对于牛乳中青霉素残留量的快速检测十分必要。本标准提供了一种酶联免疫吸附测定法，可以快速、准确地检测牛乳中的青霉素残留量。

1. 原理
本方法采用酶联免疫吸附测定法，利用特异性抗体与青霉素结合，形成抗原-抗体复合物，再通过酶标记的二抗与抗原-抗体复合物结合，形成酶标记的复合物。加入底物后，酶催化底物变色，通过测定光密度值来计算样品中青霉素的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
- 青霉素标准品
- 牛乳样品
- 青霉素抗体
- 酶标记的二抗
- 底物
- 缓冲液

2.2 仪器
- 酶标仪
- 洗板机
- 微量移液器

3. 操作步骤
3.1 样品处理
将牛乳样品离心，取上清液，加入等体积的缓冲液，混匀后即可使用。

3.2 标准曲线制备
将青霉素标准品按照一定的浓度系列稀释，制备出一系列不同浓度的标准品。将标准品加入微孔板中，加入青霉素抗体，孵育后洗板，加入酶标记的二抗，孵育后洗板，加入底物，孵育后测定光密度值。根据光密度值绘制标准曲线。

3.3 样品检测
将处理好的样品加入微孔板中，加入青霉素抗体，孵育后洗板，加入酶标记的二抗，孵育后洗板，加入底物，孵育后测定光密度值。根据标准曲线计算样品中青霉素的含量。

4. 结果计算
根据标准曲线计算样品中青霉素的含量，单位为μg/L。

5. 结论判定
若样品中青霉素含量超过国家标准规定的限量，则判定为不合格。

相关标准
- GB 31650-2019 牛乳中青霉素残留量的限量和检测方法
- GB/T 5009.156-2016 食品中青霉素的测定 高效液相色谱法
- GB/T 23594-2009 食品中青霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
- GB/T 23593-2009 食品中青霉素残留量的测定 液相色谱法
- GB/T 23592-2009 食品中青霉素残留量的测定 气相色谱法