安乃近是一种广谱抗菌药物，常用于兽医领域。为了保证兽用抗菌药物制剂的质量，需要对其中的安乃近进行测定。本标准提供了一种高效液相色谱法的测定方法。

1. 仪器和试剂
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱：C18色谱柱
1.3 称量精度为0.1mg的天平
1.4 甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氢氧化钠、氢氯酸、乙酸等试剂

2. 样品制备
将样品粉末称取适量，加入甲醇中，超声处理10min，离心沉淀，取上清液，再用甲醇重复上述操作，将两次上清液合并，用甲醇定容至初始体积，摇匀，过滤。

3. 色谱条件
3.1 流动相：甲醇-水（70:30）
3.2 流速：1.0mL/min
3.3 柱温：30℃
3.4 检测波长：254nm

4. 标准曲线的制备
4.1 取安乃近标准品，称取适量，加入甲醇中，摇匀，过滤。
4.2 取不同浓度的标准品，分别注入色谱仪，记录峰面积，绘制标准曲线。

5. 样品测定
5.1 取样品适量，注入色谱仪，记录峰面积。
5.2 根据标准曲线计算样品中安乃近的含量。

6. 结果计算
样品中安乃近的含量，按下式计算：
C=（As/Ap）×Cp
其中，C为样品中安乃近的含量（mg/mL）；
As为样品峰面积；
Ap为标准品峰面积；
Cp为标准品浓度（mg/mL）。

相关标准
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