DB32/T 1038-2007
水产品中呋喃唑酮代谢物的测定 酶联免疫法
发布时间:2007-04-28 实施时间:2007-06-28


呋喃唑酮是一种广泛应用于水产养殖中的抗生素,但其代谢物对人体健康有一定的影响。因此,对水产品中呋喃唑酮代谢物的测定显得尤为重要。本标准采用酶联免疫法进行测定,具有灵敏度高、准确度高、操作简便等优点。

1.范围
本标准适用于鱼类、贝类、虾类等水产品中呋喃唑酮代谢物的测定。

2.试剂和仪器
2.1 试剂
(1)呋喃唑酮代谢物标准品
(2)呋喃唑酮代谢物抗体
(3)辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体
(4)磷酸缓冲液
(5)PBS缓冲液
(6)Tween-20
(7)BSA
(8)TMB底物液
(9)硫酸
(10)乙醇

2.2 仪器
(1)微孔板洗板机
(2)微孔板读板机

3.样品处理
3.1 样品的制备
将样品取出,去除骨头、壳、内脏等杂质,然后将样品切成小块,加入PBS缓冲液中,搅拌均匀,离心沉淀,取上清液备用。

3.2 样品的提取
取上清液1mL,加入呋喃唑酮代谢物标准品10μL,加入乙醇200μL,混匀后离心沉淀,取上清液备用。

4.酶联免疫法测定
4.1 微孔板的涂覆
将呋喃唑酮代谢物抗体加入磷酸缓冲液中,浓度为10μg/mL,将其涂覆在微孔板上,放置4℃过夜。

4.2 标准曲线的制备
将呋喃唑酮代谢物标准品加入PBS缓冲液中,制成不同浓度的标准曲线。

4.3 样品的检测
将样品加入微孔板中,加入辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体,混匀后放置室温30min,洗板3次,加入TMB底物液,放置室温15min,加入硫酸停止反应,测定吸光度值。

5.结果的计算
根据标准曲线计算出样品中呋喃唑酮代谢物的浓度。

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