脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是一种常见的饲料中的真菌毒素，对动物健康有很大的影响。因此，对饲料中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)进行检测是非常必要的。本标准采用酶联免疫吸附法进行检测。

1. 原理
酶联免疫吸附法是一种基于抗原与抗体特异性结合的免疫学检测方法。本方法采用特异性抗体与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)结合，形成抗原-抗体复合物，再通过酶标记的二抗与抗原-抗体复合物结合，形成酶标记的抗原-抗体-抗原-抗体复合物。最后通过底物的酶促反应，产生显色反应，从而检测出脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
(1) 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)标准品
(2) 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)抗体
(3) 酶标记的二抗
(4) 底物
(5) 缓冲液
(6) 清洗缓冲液
(7) 停止液
(8) 标准品稀释液
(9) 样品提取液

2.2 仪器
(1) 酶标仪
(2) 洗板机
(3) 离心机
(4) 恒温水浴器
(5) 称量器
(6) 离心管
(7) 显微镜

3. 操作步骤
3.1 标准品的制备
将脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)标准品按照不同浓度进行稀释，制备出一系列标准品。

3.2 样品的提取
将饲料样品称取一定量，加入样品提取液中，振荡混合，离心沉淀，取上清液进行下一步操作。

3.3 酶联免疫吸附法检测
(1) 在96孔板中加入标准品和样品，每个孔位加入100μL。
(2) 加入脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)抗体，孵育1小时。
(3) 洗板，加入酶标记的二抗，孵育1小时。
(4) 洗板，加入底物，孵育30分钟。
(5) 加入停止液，测定吸光度值。
(6) 通过标准曲线计算出样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的含量。

4. 结果判定
根据标准曲线计算出样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的含量，如果含量超过国家标准规定的限量，则判定为不合格。

相关标准
GB/T 23594-2009 饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定 液相色谱法
GB/T 23593-2009 饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定 高效液相色谱法
GB/T 23592-2009 饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定 气相色谱法
GB/T 23591-2009 饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定 酶联免疫吸附法
GB/T 23590-2009 饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定 毛细管电泳法