利巴韦林是一种广谱抗病毒药物，可用于治疗乙型肝炎、丙型肝炎等病毒感染性疾病。然而，利巴韦林在动物体内代谢缓慢，易在动物组织中残留，对人体健康造成潜在威胁。因此，对于利巴韦林在动物组织中的残留量进行监测和控制，具有重要的意义。

本标准采用液相色谱-串联质谱法测定鸡肝中利巴韦林及其代谢物的残留总量。具体操作步骤如下：

1. 样品制备

取鸡肝样品，加入甲醇进行提取，离心后取上清液，用氮气吹干，加入甲醇重溶，过滤后即可进行检测。

2. 仪器条件

液相色谱-串联质谱仪：Triple Quad 5500

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（2.1 mm×50 mm，1.8 μm）

流动相A：0.1%甲酸水溶液

流动相B：甲醇

梯度洗脱程序：0-1.5 min，5% B；1.5-2.5 min，5%-95% B；2.5-3.5 min，95% B；3.5-3.6 min，95%-5% B；3.6-4.5 min，5% B

流速：0.3 mL/min

进样量：10 μL

质谱条件：

电离方式：电喷雾离子源（ESI）

离子源温度：500℃

离子源电压：4500 V

气体1流量：50 psi

气体2流量：50 psi

碰撞气体：氦气

碰撞能量：35 eV

多反应监测（MRM）模式：利巴韦林（m/z 227.1→184.1）、利巴韦林羟基代谢物（m/z 243.1→200.1）、利巴韦林羟基代谢物2（m/z 259.1→216.1）

3. 标准曲线制备

取利巴韦林和其代谢物的标准品，分别加入甲醇中制备不同浓度的标准溶液，用同样的方法进行提取和检测，绘制标准曲线。

4. 检测样品

将样品加入进样瓶中，用同样的方法进行提取和检测，根据标准曲线计算出样品中利巴韦林及其代谢物的残留总量。

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