DB32/T 1458-2009
兔出血症病毒的检测 RT-PCR方法
发布时间:2009-09-16 实施时间:2009-12-16
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兔出血症病毒是一种致病性病毒,能够引起兔出血症病,严重影响兔的生产和养殖。因此,对兔出血症病毒的检测具有重要意义。RT-PCR是一种高灵敏度、高特异性的检测方法,已经成为兔出血症病毒检测的主要方法之一。
本标准规定了兔出血症病毒的检测 RT-PCR方法。具体步骤如下:
1.样品采集
样品采集应在病兔死亡后24小时内进行,采集血液、脾脏、肝脏、肺等组织样品。采集时应注意避免污染,避免样品受到损伤。
2.提取 RNA
样品提取 RNA 应采用适当的 RNA 提取试剂盒,按照试剂盒说明书进行操作。提取 RNA 后,应进行纯度和浓度检测。
3.RT-PCR反应体系的组成
RT-PCR反应体系应包括:RNA 模板、逆转录酶、PCR引物、PCR扩增酶、dNTPs、缓冲液等。具体反应体系的组成应根据试剂盒说明书进行操作。
4.PCR程序
PCR程序应根据试剂盒说明书进行操作。一般情况下,PCR程序包括:逆转录反应、PCR扩增反应、终止扩增反应等步骤。
5.结果判定
PCR扩增产物应进行凝胶电泳检测,根据扩增产物的大小和数量判断样品是否为兔出血症病毒阳性。
本标准的实施可以提高兔出血症病毒的检测效率和准确性,对于保障兔的健康和养殖业的发展具有重要意义。
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