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一、范围
本标准适用于养殖水体中细菌总数的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格及试验方法
GB/T 17219 水质标准和水质分级
GB/T 17854 水质微生物学通用技术要求和检验方法
GB/T 19495 水质微生物学实验室质量控制规范
GB/T 20388 水质微生物学实验室安全规范

三、定义
3.1 养殖水体：指用于养殖的水体，包括池塘、水库、水产养殖场等。
3.2 细菌总数：指养殖水体中所有细菌的数量。

四、原理
将样品中的细菌通过荧光染色后，在荧光显微镜下进行计数，得到细菌总数。

五、仪器和设备
5.1 荧光显微镜
5.2 荧光显微计数器
5.3 恒温恒湿箱
5.4 离心机
5.5 超净工作台

六、试剂和材料
6.1 荧光素钠
6.2 磷酸盐缓冲液
6.3 甲醛
6.4 无菌纯水

七、样品的采集和处理
7.1 样品的采集
样品应在养殖水体中心位置采集，避免靠近岸边、进水口、出水口等位置采集。
7.2 样品的处理
样品应在采集后立即送至实验室进行处理。样品处理前应先进行筛选，去除大颗粒物质。样品的处理方法应根据实际情况进行选择。

八、操作步骤
8.1 样品的制备
取适量样品，加入磷酸盐缓冲液，制备样品悬浮液。
8.2 荧光染色
将样品悬浮液加入荧光素钠，混匀后加入甲醛固定，静置15分钟。
8.3 荧光显微计数
将荧光染色后的样品悬浮液滴于荧光显微计数器上，进行荧光显微计数。
8.4 计算细菌总数
根据荧光显微计数器上的计数结果，计算出细菌总数。

九、质量控制
9.1 仪器的校准
荧光显微计数器应在使用前进行校准。
9.2 平行样品的处理
应同时处理平行样品，以检验实验结果的可靠性。
9.3 质量控制记录
应记录实验过程中的各项质量控制数据。

十、结果的表达
应将实验结果按照细菌总数的数量进行表达，并注明样品的来源、采集时间和地点等信息。

十一、报告
实验报告应包括样品的来源、采集时间和地点、实验方法、实验结果、质量控制数据等内容。

相关标准：
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格及试验方法
GB/T 17219 水质标准和水质分级
GB/T 17854 水质微生物学通用技术要求和检验方法
GB/T 19495 水质微生物学实验室质量控制规范
GB/T 20388 水质微生物学实验室安全规范