DB32/T 2260-2012
甘蓝品种纯度及真实性 SSR分子检测方法
发布时间:2012-12-28 实施时间:2013-02-28
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甘蓝是我国重要的蔬菜作物之一,其品种繁多,品种纯度及真实性的鉴定对于保障甘蓝种质资源的合理利用和推广具有重要意义。本标准旨在规范甘蓝品种纯度及真实性SSR分子检测方法,为甘蓝品种鉴定提供技术支持。
1.范围
本标准适用于甘蓝品种纯度及真实性SSR分子检测方法。
2.检测原理
利用PCR扩增技术,对甘蓝品种进行SSR分子检测,通过检测甘蓝品种的DNA序列,判断其品种纯度及真实性。
3.检测方法
3.1 样品采集
从甘蓝植株中采集新鲜叶片,将其置于2mL离心管中,加入液氮冷冻并保存于-80℃冰箱中备用。
3.2 DNA提取
将离心管中的叶片样品取出,加入提取液中,进行DNA提取。提取液的配制方法详见附录A。
3.3 PCR扩增
将提取的DNA样品进行PCR扩增,扩增条件详见附录B。
3.4 电泳分析
将PCR扩增产物进行电泳分析,分析条件详见附录C。
4.结果判定
根据电泳图谱,判断甘蓝品种的纯度及真实性。若PCR扩增产物与目标品种的电泳图谱一致,则判定为该品种;若PCR扩增产物与目标品种的电泳图谱不一致,则判定为非该品种。
5.质量控制
5.1 实验室环境应符合PCR扩增实验的要求,避免污染。
5.2 所有试剂应按照说明书操作,避免误操作。
5.3 所有实验操作应按照标准操作规程进行,避免误差。
相关标准:
GB/T 20481-2006 作物种质资源检验规程
GB/T 20482-2006 作物种质资源鉴定规程
GB/T 20483-2006 作物种质资源保藏规程
GB/T 20484-2006 作物种质资源信息管理规程
GB/T 20485-2006 作物种质资源利用规程