DB31/T 431-2009
猪流感病毒HA1/HA3、NA1/NA2亚型多重RT-PCR检测方法
发布时间:2009-03-05 实施时间:2009-06-01


猪流感病毒是一种由猪流感病毒引起的疾病,其病原体主要是猪流感病毒。猪流感病毒是一种RNA病毒,其基因组由8个单链RNA分子组成,分别编码HA、NA、M、NP、NS、PA、PB1和PB2等蛋白质。其中,HA和NA是猪流感病毒的主要抗原,也是疫苗的主要成分。因此,对猪流感病毒HA1/HA3、NA1/NA2亚型的检测具有重要意义。

本标准采用多重RT-PCR技术,通过特异性引物扩增猪流感病毒HA1/HA3、NA1/NA2亚型的基因片段,从而实现对猪流感病毒的检测。具体步骤如下:

1. 样品处理:将样品进行处理,提取病毒RNA。

2. RT-PCR反应:将提取的RNA进行逆转录反应,得到cDNA。然后进行多重PCR反应,扩增HA1/HA3、NA1/NA2亚型的基因片段。

3. 电泳分析:将PCR产物进行电泳分析,根据PCR产物的大小和带型,判断是否存在猪流感病毒。

本标准要求PCR反应的引物和探针具有高度的特异性和灵敏度,能够准确地检测猪流感病毒HA1/HA3、NA1/NA2亚型的基因片段。同时,还要求PCR反应的条件和操作过程具有可重复性和稳定性,能够保证检测结果的准确性和可靠性。

相关标准:
1. GB/T 22470-2008 猪流感病毒检测方法
2. DB31/T 432-2009 猪流感病毒HA亚型单重RT-PCR检测方法
3. DB31/T 433-2009 猪流感病毒NA亚型单重RT-PCR检测方法
4. DB31/T 434-2009 猪流感病毒HA亚型多重RT-PCR检测方法
5. DB31/T 435-2009 猪流感病毒NA亚型多重RT-PCR检测方法