DB31/T 531-2011
动物戊型肝炎RT-nPCR和ELISA检测方法
发布时间:2011-04-19 实施时间:2011-08-01


动物戊型肝炎是由戊型肝炎病毒引起的一种急性传染病,主要感染猪、狗等动物。为了保障动物健康和人类食品安全,需要对动物戊型肝炎进行检测。本标准旨在规范动物戊型肝炎RT-nPCR和ELISA检测方法,提高检测的准确性和可靠性。

1. 范围
本标准适用于动物戊型肝炎RT-nPCR和ELISA检测方法。

2. 术语和定义
2.1 动物戊型肝炎:由戊型肝炎病毒引起的一种急性传染病。
2.2 RT-nPCR:反转录聚合酶链式反应,是一种检测RNA的方法。
2.3 ELISA:酶联免疫吸附试验,是一种检测抗体或抗原的方法。

3. 要求
3.1 仪器和试剂
3.1.1 RT-nPCR仪器和试剂应符合国家相关标准。
3.1.2 ELISA仪器和试剂应符合国家相关标准。
3.2 操作人员
3.2.1 操作人员应具备相关专业知识和技能。
3.2.2 操作人员应严格按照操作规程进行操作。
3.3 操作环境
3.3.1 操作环境应符合国家相关标准。
3.3.2 操作环境应保持干净、整洁、无尘、无菌。
3.4 操作步骤
3.4.1 RT-nPCR操作步骤
(1)样品处理:将样品加入提取液中,离心后取上清液。
(2)RNA提取:将上清液加入RNA提取试剂中,离心后取上清液。
(3)反转录:将RNA加入反转录试剂中,进行反转录反应。
(4)PCR扩增:将反转录产物加入PCR试剂中,进行PCR扩增。
(5)结果分析:将PCR产物进行凝胶电泳,观察结果。
3.4.2 ELISA操作步骤
(1)样品处理:将样品加入ELISA板中,孵育一定时间。
(2)洗涤:将ELISA板洗涤干净。
(3)加入检测试剂:加入检测试剂,孵育一定时间。
(4)洗涤:将ELISA板洗涤干净。
(5)加入底物:加入底物,孵育一定时间。
(6)结果分析:观察颜色变化,判断结果。

4. 结果判定和报告
4.1 RT-nPCR结果判定
(1)阳性:出现明显的特异性条带。
(2)阴性:未出现特异性条带。
4.2 ELISA结果判定
(1)阳性:OD值大于阈值。
(2)阴性:OD值小于阈值。
4.3 报告
(1)报告应包括样品信息、检测方法、结果判定等内容。
(2)报告应符合国家相关标准。

相关标准:
GB/T 22470-2008 动物疫病检验通则
GB/T 22471-2008 动物疫病检验方法
GB/T 22472-2008 动物疫病检验结果判定
GB/T 22473-2008 动物疫病检验报告
GB/T 22474-2008 动物疫病检验质量控制