DB31/T 1002-2016
黄瓜花叶病毒检疫鉴定方法
发布时间:2016-08-22 实施时间:2016-12-01
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黄瓜花叶病毒是一种常见的病毒,能够感染黄瓜、西瓜、甜瓜等瓜类作物,严重影响农业生产。为了保障农业生产安全,需要对瓜类作物进行病毒检测和鉴定。本标准旨在规范黄瓜花叶病毒的检疫鉴定方法,确保检测结果准确可靠。
1. 试验材料
试验材料为疑似感染黄瓜花叶病毒的植物样品,包括叶片、茎、根等部位。样品应选取病情较重、病情明显的部位。
2. 病毒检测
2.1 样品制备
将样品切成小块,加入适量的磷酸盐缓冲液,用搅拌器搅拌均匀,离心沉淀,取上清液作为检测样品。
2.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)
将检测样品加入包被有黄瓜花叶病毒抗体的微孔板中,经过一系列的洗涤、添加酶标记抗体、显色等步骤后,根据颜色变化判断样品中是否含有黄瓜花叶病毒。
2.3 聚合酶链式反应(PCR)
将检测样品提取出RNA或DNA,进行PCR扩增,根据扩增产物的大小和序列判断样品中是否含有黄瓜花叶病毒。
3. 病毒分离
将样品制备成病毒提取液,接种到寄主植物上,观察寄主植物是否出现病症,根据病症判断样品中是否含有黄瓜花叶病毒。
4. 病毒鉴定
根据病毒形态、生物学特性、分子特性等方面的特征,对检测到的黄瓜花叶病毒进行鉴定。
相关标准:
1. GB/T 16180-2019 植物病毒检疫鉴定方法
2. GB/T 16181-2019 植物病毒检测方法
3. GB/T 16182-2019 植物病毒分离方法
4. GB/T 16183-2019 植物病毒鉴定方法
5. GB/T 16184-2019 植物病毒检测质量控制方法