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一、范围
本标准适用于饲料中角黄素含量的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水质量规格及评价方法
GB/T 6688 分析化学实验室安全操作规程
GB/T 20394 饲料中维生素含量的测定 高效液相色谱法
GB/T 22388 饲料中脂溶性维生素含量的测定 高效液相色谱法
GB/T 22389 饲料中水溶性维生素含量的测定 高效液相色谱法

三、原理
将样品中的角黄素提取出来，经过净化处理后，采用高效液相色谱法进行分离和检测。

四、仪器和设备
1.高效液相色谱仪
2.分光光度检测器
3.样品处理设备
4.电子天平
5.移液器
6.离心机

五、试剂和材料
1.甲醇
2.乙腈
3.乙酸
4.氯仿
5.硅胶
6.角黄素标准品

六、操作步骤
1.样品的制备
将样品粉碎并筛选，取1g样品加入10ml甲醇中，超声处理10min，离心10min，取上清液备用。
2.样品的净化
将上述上清液加入10ml氯仿中，振荡5min，离心10min，取上清液，加入1g硅胶，振荡5min，离心10min，取上清液，加入1ml乙酸，振荡5min，离心10min，取上清液，加入1ml乙腈，振荡5min，离心10min，取上清液，即为净化后的样品。
3.样品的检测
将净化后的样品注入高效液相色谱仪中，采用分光光度检测器进行检测，检测波长为450nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，采用角黄素标准品进行定量。

七、计算
样品中角黄素的含量（mg/kg）=（样品中角黄素的峰面积/标准品中角黄素的峰面积）×标准品中角黄素的含量×1000/样品的质量

八、结果表示
样品中角黄素的含量应该按照mg/kg表示，并保留两位小数。

九、质量控制
1.样品的制备和检测应该在实验室内进行，避免外界干扰。
2.样品的制备和检测应该按照标准操作规程进行，避免误差。
3.样品的检测应该进行质量控制，包括空白对照、标准品对照和样品对照。

相关标准：
GB/T 6682 分析化学实验室用水质量规格及评价方法
GB/T 6688 分析化学实验室安全操作规程
GB/T 20394 饲料中维生素含量的测定 高效液相色谱法
GB/T 22388 饲料中脂溶性维生素含量的测定 高效液相色谱法
GB/T 22389 饲料中水溶性维生素含量的测定 高效液相色谱法