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玉米是我国重要的粮食作物之一，其品种繁多，为了保证种子的纯度和品质，需要进行品种纯度检测。本标准介绍了一种基于SSR分子标记的玉米品种（单交种）纯度检测方法。

1. 范围
本标准适用于玉米品种（单交种）的纯度检测。

2. 原理
利用SSR分子标记对玉米品种（单交种）进行纯度检测。首先从样品中提取DNA，然后进行PCR扩增，扩增产物经过电泳分离，最后根据扩增产物的大小和数量进行数据分析，判断样品的纯度。

3. 试剂和仪器
3.1 试剂
PCR扩增试剂盒、琼脂糖、TAE缓冲液、DNA分子量标准品等。
3.2 仪器
PCR仪、电泳仪、紫外分光光度计等。

4. 样品的提取
4.1 样品的准备
将玉米种子或幼苗样品放入离心管中，加入适量的液氮，研磨成细粉末。
4.2 DNA的提取
将细粉末加入提取液中，振荡混合，离心沉淀，取上清液，加入异丙醇，离心沉淀，取上清液，加入乙酸钠，离心沉淀，取上清液，加入等体积的冷乙醇，离心沉淀，取上清液，干燥后加入TE缓冲液，混匀，即得到DNA样品。

5. PCR扩增
5.1 PCR反应体系
PCR反应体系如下表所示：

试剂 体积/质量

10×PCR缓冲液 2.5 μL
25 mmol/L MgCl2 2.5 μL
2.5 mmol/L dNTPs 1.0 μL
10 μmol/L SSR引物 1.0 μL
Taq DNA聚合酶 0.25 μL
DNA模板 50 ng
去离子水 加至25 μL

5.2 PCR反应条件
PCR反应条件如下表所示：

步骤 温度 时间

预变性 94℃ 5 min
变性 94℃ 30 s
退火 55℃ 30 s
延伸 72℃ 30 s
最终延伸 72℃ 10 min
保温 4℃ ∞

6. 电泳分离和数据分析
将PCR扩增产物进行电泳分离，根据扩增产物的大小和数量进行数据分析，判断样品的纯度。

相关标准：
GB/T 17215.321-2008 玉米种子品质检验方法 第21部分：品种纯度检验
GB/T 17215.322-2008 玉米种子品质检验方法 第22部分：杂质检验
GB/T 17215.323-2008 玉米种子品质检验方法 第23部分：水分含量检验
GB/T 17215.324-2008 玉米种子品质检验方法 第24部分：杂质含量检验
GB/T 17215.325-2008 玉米种子品质检验方法 第25部分：萌发力检验