一、范围
本标准适用于保健食品中紫丁香甙的测定。

二、仪器设备
1. 高效液相色谱仪：采用二元梯度系统，具有紫外检测器和荧光检测器。
2. 色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
3. 称量仪、pH计、超声波清洗仪等。

三、试剂和材料
1. 紫丁香甙标准品：纯度≥98%。
2. 甲醇、乙腈、乙酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氢氧化钠、氢氯酸等。
3. 保健食品样品。

四、操作步骤
1. 标准曲线的制备
取不同浓度的紫丁香甙标准品，分别加入甲醇中制成不同浓度的标准溶液，用高效液相色谱法测定各浓度下的峰面积，绘制标准曲线。
2. 样品的制备
取保健食品样品，粉碎后称取适量，加入甲醇中超声提取，离心后取上清液。
3. 色谱条件
流动相A：0.1%磷酸二氢钾水溶液，pH值调至3.0；流动相B：乙腈。梯度洗脱：0-10min，A：B=90:10→70:30；10-20min，A：B=70:30→50:50；20-30min，A：B=50:50→30:70；30-40min，A：B=30:70→10:90；40-50min，A：B=10:90→90:10。流速：1.0mL/min。柱温：25℃。检测波长：紫外检测器为330nm，荧光检测器为λex=330nm，λem=420nm。
4. 样品的测定
用高效液相色谱法测定样品中紫丁香甙的含量，根据标准曲线计算出样品中紫丁香甙的含量。

五、结果计算
样品中紫丁香甙的含量，按下式计算：
C=（As/A标准）×C标准×V样品/V标准
其中，C为样品中紫丁香甙的含量（mg/g），As为样品中紫丁香甙的峰面积，A标准为标准品中紫丁香甙的峰面积，C标准为标准品中紫丁香甙的浓度（mg/mL），V样品为样品提取液的体积（mL），V标准为标准品的体积（mL）。

六、质量控制
1. 标准品的制备应严格按照标准要求进行。
2. 样品的提取和测定应重复3次，取平均值作为最终结果。
3. 每次测定前应进行系统适应性试验，确保仪器状态稳定。

相关标准
1. GB/T 5009.3-2016 食品中灰分的测定
2. GB/T 5009.4-2017 食品中粗脂肪的测定
3. GB/T 5009.5-2016 食品中粗蛋白的测定
4. GB/T 5009.6-2016 食品中水分的测定
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