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一、范围
本标准适用于动物性食品中磺胺二甲嘧啶残留量的液相色谱法测定。

二、方法原理
样品经提取、净化后，采用高效液相色谱法进行分离，检测器采用紫外检测器，外标法定量。

三、仪器设备和试剂
1.高效液相色谱仪
2.紫外检测器
3.色谱柱：C18色谱柱
4.移液器
5.量筒
6.离心机
7.超声波清洗器
8.甲醇
9.乙腈
10.乙酸
11.磷酸二氢钾
12.硫酸
13.氯仿
14.硫酸钠
15.硝酸钠
16.硝酸银
17.氢氧化钠
18.硝基苯
19.磺胺二甲嘧啶标准品

四、样品处理
1.样品准备：将样品称取5g，加入50mL氯仿，超声波清洗10min，离心10min，取上清液过滤，取1mL过滤液加入10mL甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液过滤，即为样品提取液。
2.样品净化：将样品提取液加入C18色谱柱中，用甲醇-水（70:30）洗脱，收集洗脱液，用甲醇-水（90:10）洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至1mL，即为样品净化液。

五、操作步骤
1.色谱条件设置：流速1.0mL/min，检测波长254nm，柱温25℃。
2.外标法定量：将磺胺二甲嘧啶标准品按0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L浓度分别制成标准溶液，用样品净化液稀释至相应浓度，注入色谱仪进行检测，建立标准曲线，计算样品中磺胺二甲嘧啶的含量。

六、结果计算
样品中磺胺二甲嘧啶的含量，按下式计算：
C=（A-B）/a×V
其中，C为磺胺二甲嘧啶的含量（mg/kg），A为样品检测峰面积，B为空白峰面积，a为标准曲线斜率，V为样品净化液的体积（mL）。

七、质量控制
1.空白对照：用同样的方法处理不含磺胺二甲嘧啶的样品，检测空白峰面积，应小于检测限。
2.加标回收率：在样品中加入已知浓度的磺胺二甲嘧啶标准品，进行提取、净化、检测，计算加标回收率，应在80%~120%之间。

八、分析报告
分析报告应包括样品名称、样品编号、检测日期、检测方法、检测结果等内容。

相关标准：
1. GB/T 5009.155-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 高效液相色谱法
2. GB/T 5009.156-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
3. GB/T 5009.157-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 气相色谱法
4. GB/T 22388-2008 动物性食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱法
5. GB/T 22389-2008 动物性食品中磺胺类药物残留量的测定 气相色谱法