硒是人体必需的微量元素之一，对人体健康有着重要的作用。但是，过量的硒会对人体造成危害。因此，对于生物材料中的硒含量进行测定是非常必要的。本标准就是为了规范生物材料中总硒的测定方法。

1. 原理
样品中的硒在酸性条件下与亚硝酸钠反应生成亚硒酸钠，再与二苯基卡巴肼反应生成紫色化合物，其吸光度与硒的含量成正比。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
(1) 亚硝酸钠：AR级。
(2) 二苯基卡巴肼：AR级。
(3) 硫酸：AR级。
(4) 硝酸：AR级。
(5) 氢氧化钠：AR级。
(6) 氯化钠：AR级。
(7) 氯仿：AR级。
(8) 石英量筒：10 mL。
(9) 紫外可见分光光度计。

2.2 仪器
紫外可见分光光度计。

3. 操作步骤
3.1 样品的制备
将样品称取适量，加入硝酸和硫酸，加热至样品完全溶解，冷却后加入氢氧化钠调节pH值，加入氯化钠，用氯仿萃取，离心分离，取上清液。

3.2 样品的测定
取上清液10 mL，加入亚硝酸钠，放置10 min，加入二苯基卡巴肼，放置10 min，用紫外可见分光光度计测定吸光度值。

4. 计算
用标准曲线法计算样品中硒的含量。

相关标准
GB/T 5009.93-2017 食品中硒的测定
GB/T 22220-2008 饲料中硒的测定
GB/T 22221-2008 药品中硒的测定
GB/T 35590-2017 化妆品中硒的测定
GB/T 5009.268-2016 食品安全国家标准 硒的测定