硝呋烯腙是一种广泛用于饲料中的抗生素，但其过量使用会对动物健康产生不良影响，因此需要对饲料中硝呋烯腙进行测定。本标准采用液相色谱-质谱/质谱法进行测定，具有灵敏度高、准确性好、重现性高等优点。

1. 原理
将样品经过提取、净化后，采用液相色谱-质谱/质谱法进行测定。在质谱检测器中，硝呋烯腙的分子离子在质荷比为261的位置出现，利用该特征离子进行定量分析。

2. 仪器和设备
液相色谱-质谱/质谱仪、离心机、超声波清洗器、pH计、电子天平等。

3. 试剂和材料
甲醇、乙腈、乙酸、乙酸乙酯、硝呋烯腙标准品、饲料样品等。

4. 操作步骤
（1）样品制备：将饲料样品粉碎并筛选，取1g样品加入50mL离子交换水中，超声波处理30min，离心10min，取上清液过滤，取10mL上清液加入10mL甲醇中，离心10min，取上清液过滤，即为样品提取液。
（2）样品净化：将样品提取液加入固相萃取柱中，用甲醇-水（70:30）洗脱，用甲醇洗脱，用氮气吹干，加入5mL甲醇中，超声波处理30min，离心10min，取上清液过滤，即为样品净化液。
（3）质谱测定：将样品净化液注入液相色谱-质谱/质谱仪中，采用电喷雾离子源进行质谱检测，利用硝呋烯腙的分子离子进行定量分析。

5. 结果计算
利用硝呋烯腙标准品进行定量分析，计算样品中硝呋烯腙的含量。

相关标准
GB/T 5009.199-2017 饲料中硝呋烯腙的测定 气相色谱法
GB/T 23531-2009 饲料中硝呋烯腙的测定 高效液相色谱法
GB/T 23532-2009 饲料中硝呋烯腙的测定 液相色谱-紫外检测法
GB/T 23533-2009 饲料中硝呋烯腙的测定 液相色谱-荧光检测法
GB/T 23534-2009 饲料中硝呋烯腙的测定 液相色谱-电化学检测法