饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐是一种常用的饲料添加剂，能够提高动物的生长速度和免疫力。为了保证饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐的质量，需要对其进行测定。本标准规定了饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐的测定方法，以便进行质量控制和检验。

1. 原理
将饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐与硫酸铵反应生成L-赖氨酸，再用二氧化硅吸附柱分离L-赖氨酸，最后用高效液相色谱法测定L-赖氨酸的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
（1）L-赖氨酸盐酸盐标准品
（2）硫酸铵
（3）乙醇
（4）二氧化硅吸附柱
（5）甲醇
（6）乙腈
（7）磷酸二氢钾
（8）磷酸氢二钠
（9）乙酸钠
（10）乙酸
（11）水
2.2 仪器
（1）高效液相色谱仪
（2）电子天平
（3）pH计
（4）真空泵
（5）过滤器

3. 操作步骤
3.1 样品的制备
将饲料添加剂L-赖氨酸盐酸盐样品称取0.5g，加入50mL的水中，用超声波处理30min，过滤，取滤液10mL，加入10mL的硫酸铵溶液，混合均匀，静置10min，离心，取上清液5mL，加入5mL的乙醇，混合均匀，静置10min，离心，取上清液2mL，即为样品液。

3.2 标准曲线的制备
取L-赖氨酸盐酸盐标准品0.1g，加入50mL的水中，用超声波处理30min，过滤，取滤液10mL，加入10mL的硫酸铵溶液，混合均匀，静置10min，离心，取上清液5mL，加入5mL的乙醇，混合均匀，静置10min，离心，取上清液2mL，加入2mL的甲醇，混合均匀，即为标准液。

3.3 样品的处理
将样品液加入二氧化硅吸附柱中，用甲醇洗涤，收集洗涤液，用乙腈洗脱，收集洗脱液，加入磷酸二氢钾溶液，混合均匀，静置10min，离心，取上清液2mL，加入2mL的甲醇，混合均匀，即为样品处理液。

3.4 色谱条件
色谱柱：C18色谱柱
流动相：甲醇-水（含0.1%乙酸）（70:30）
流速：1.0mL/min
检测波长：254nm
进样量：10μL

3.5 标准曲线的绘制
取不同浓度的标准液，用上述方法处理，测定L-赖氨酸的峰面积，绘制标准曲线。

3.6 样品的测定
用上述方法处理样品处理液，测定L-赖氨酸的峰面积，根据标准曲线计算出L-赖氨酸的含量。

4. 结果计算
样品中L-赖氨酸的含量，按下式计算：
L-赖氨酸含量（%）=（样品中L-赖氨酸的质量÷样品中L-赖氨酸盐酸盐的质量）×100%

5. 精密度和准确度
5.1 精密度
在同一实验室内，重复测定6个样品，计算相对标准偏差（RSD），RSD不应大于2.0%。
5.2 准确度
将已知浓度的标准品加入样品中，测定其回收率，回收率应在98%~102%之间。

相关标准
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