饲料用酶制剂是一种能够提高动物对饲料中营养成分利用率的添加剂。其中酸性蛋白酶是一种常用的酶制剂,其主要作用是降解饲料中的蛋白质,使其更易于动物消化吸收。因此,酸性蛋白酶活力的测定对于饲料用酶制剂的质量控制具有重要意义。
本标准采用分光光度法测定饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力。具体操作步骤如下:
1. 样品制备
将饲料用酶制剂样品称取0.1g,加入10mL的0.1mol/L的醋酸钠缓冲液(pH4.5),在37℃下振荡孵育30min,然后离心10min,取上清液备用。
2. 标准曲线制备
取0.1mol/L的醋酸钠缓冲液(pH4.5)分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL的酸性蛋白酶标准液(1mg/mL),加入10mL的试管中,最终体积调至10mL,混匀后在37℃下孵育30min,然后加入1mL的10%三氯醋酸,离心10min,取上清液,用0.1mol/L的NaOH调节pH至8.5,最终体积调至10mL,混匀后即得标准曲线。
3. 测定
取样品制备中的上清液0.5mL,加入10mL的试管中,加入0.5mL的0.1mol/L的醋酸钠缓冲液(pH4.5),混匀后在37℃下孵育30min,然后加入1mL的10%三氯醋酸,离心10min,取上清液,用0.1mol/L的NaOH调节pH至8.5,最终体积调至10mL,混匀后测定吸光度。
4. 计算
根据标准曲线计算出样品中酸性蛋白酶的活力。
本标准的测定方法简单、准确、可靠,适用于饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定。
相关标准
GB/T 23527-2009 饲料用酶制剂
GB/T 23528-2009 饲料用酶制剂中蛋白酶活力的测定
GB/T 23529-2009 饲料用酶制剂中纤维素酶活力的测定
GB/T 23530-2009 饲料用酶制剂中淀粉酶活力的测定
GB/T 23531-2009 饲料用酶制剂中葡萄糖氧化酶活力的测定