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己烯雌酚是一种内分泌干扰物，能够影响动物的生殖和发育，对动物的健康产生不良影响。因此，对饲料中己烯雌酚的测定显得尤为重要。本标准采用液相色谱-质谱/质谱法进行测定，具有灵敏度高、准确性好、重现性高等优点。

1.范围
本标准适用于饲料中己烯雌酚的测定。

2.仪器和试剂
2.1 仪器：液相色谱-质谱/质谱联用仪。
2.2 试剂：己烯雌酚标准品、甲醇、乙腈、水等。

3.样品的制备
3.1 取样：按照GB/T 6682的规定进行取样。
3.2 样品的制备：将样品粉碎并混匀，取适量样品加入甲醇中，超声提取30min，离心后取上清液。

4.操作步骤
4.1 仪器条件设置：按照仪器说明书进行设置。
4.2 样品的分离：采用C18色谱柱进行分离，流动相为甲醇-水（含0.1%甲酸）。
4.3 质谱检测：采用电喷雾离子源进行质谱检测，离子源温度为120℃，离子源电压为4.5kV，碰撞能量为30eV。
4.4 定量：采用多反应监测模式进行定量，以己烯雌酚的m/z为标准。

5.结果的计算
5.1 样品中己烯雌酚的含量计算公式为：C=（A/B）×C1，其中C为样品中己烯雌酚的含量（μg/kg），A为样品中己烯雌酚的峰面积，B为己烯雌酚标准品的峰面积，C1为己烯雌酚标准品的浓度（μg/mL）。
5.2 结果的计算精确到0.01μg/kg。

6.质量控制
6.1 样品的加标回收率：在样品中加入不同浓度的己烯雌酚标准品，进行加标实验，计算加标回收率。
6.2 精密度：重复测定同一样品，计算相对标准偏差。
6.3 准确度：与其他方法进行比较，计算准确度。

相关标准：
GB/T 6682-2008 饲料取样方法
GB/T 22223-2008 饲料中雌激素类物质的测定 液相色谱-质谱/质谱法
GB/T 22224-2008 饲料中雌激素类物质的测定 液相色谱-荧光检测法
GB/T 22225-2008 饲料中雌激素类物质的测定 酶联免疫吸附法
GB/T 22226-2008 饲料中雌激素类物质的测定 放射免疫测定法