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一、范围
本标准规定了家畜（猪牛羊）戊型肝炎病毒的测定 RT-PCR法的要求和方法，适用于家畜（猪牛羊）戊型肝炎病毒的检测。

二、引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质量规格和评价（ISO 3696:1987，MOD）
GB/T 14233.2-2005 试验动物规范 第2部分：家畜
GB/T 19479-2004 家畜病毒性疾病诊断标准与鉴定方法
GB/T 21415-2008 家畜病毒性疾病防治技术规范
GB/T 22908-2008 家畜病毒性疾病防治技术规范

三、术语和定义
3.1 RT-PCR法
逆转录聚合酶链式反应（Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction），是一种利用逆转录酶将RNA转录成cDNA，再利用聚合酶链式反应扩增DNA的技术。

3.2 病毒载量
单位体积内病毒的数量。

四、原理
本方法采用RT-PCR技术，通过逆转录酶将RNA转录成cDNA，再利用聚合酶链式反应扩增DNA，最终通过荧光定量PCR技术检测扩增产物，判断样品中是否存在戊型肝炎病毒。

五、试验仪器和设备
5.1 逆转录酶PCR仪
5.2 荧光定量PCR仪
5.3 电泳仪
5.4 紫外分光光度计
5.5 常规实验室设备

六、试验材料和试剂
6.1 RNA提取试剂盒
6.2 逆转录试剂盒
6.3 PCR试剂盒
6.4 荧光定量PCR试剂盒
6.5 纯化水
6.6 离心管
6.7 PCR管
6.8 PCR板
6.9 DNA分子量标准品

七、样品处理
7.1 样品采集
7.2 样品处理
7.3 RNA提取

八、RT-PCR扩增反应
8.1 逆转录反应
8.2 PCR扩增反应

九、结果判定
9.1 荧光定量PCR结果判定
9.2 病毒载量计算

十、结果报告
10.1 报告内容
10.2 报告格式

相关标准：
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质量规格和评价（ISO 3696:1987，MOD）
GB/T 14233.2-2005 试验动物规范 第2部分：家畜
GB/T 19479-2004 家畜病毒性疾病诊断标准与鉴定方法
GB/T 21415-2008 家畜病毒性疾病防治技术规范
GB/T 22908-2008 家畜病毒性疾病防治技术规范