DB22/T 2052-2014
饲料中沙门氏菌测定 实时荧光PCR方法
发布时间:2014-02-28 实施时间:2014-04-30


沙门氏菌是一种常见的食源性病原菌,能够引起人和动物的肠道感染。饲料中的沙门氏菌污染会对动物的健康产生影响,因此对饲料中沙门氏菌的检测十分重要。

本标准采用实时荧光PCR技术进行检测。该技术具有高灵敏度、高特异性、快速、准确等优点,能够在短时间内检测出样品中的沙门氏菌。

具体操作步骤如下:

1. 样品制备

将饲料样品取1克,加入10毫升的缓冲液中,混合均匀后离心,取上清液作为检测样品。

2. DNA提取

将上清液取1毫升,加入离心管中,离心后弃去上清液,加入200微升的DNA提取液,混合均匀后在65℃下孵育10分钟,然后在4℃下保存。

3. PCR反应

将提取的DNA加入PCR反应管中,加入PCR反应液,进行PCR反应。反应条件为:95℃预变性2分钟,95℃变性15秒,60℃退火30秒,72℃延伸30秒,共40个循环。

4. 数据分析

将PCR反应产生的荧光信号进行分析,根据标准曲线计算出样品中沙门氏菌的数量。

本标准还规定了实验室的设备和试剂要求,以及质量控制的要求。

相关标准
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 22274-2008 饲料中微生物检验方法
GB/T 23535-2009 饲料中细菌总数的测定
GB/T 23536-2009 饲料中霉菌和酵母菌总数的测定
GB/T 23537-2009 饲料中大肠杆菌的测定