DB22/T 2260-2015
鹿鞭鉴定方法 PCR法
发布时间:2015-02-01 实施时间:2015-03-01


鹿鞭是一种传统的中药材,具有滋补强壮、补肾壮阳等功效。然而,由于市场上存在着一些假冒伪劣的鹿鞭制品,因此需要对鹿鞭进行鉴定。本标准提供了一种基于PCR技术的鹿鞭鉴定方法。

1. 原理
本方法利用PCR技术扩增鹿属动物的线粒体DNA的控制区域,通过比对PCR产物的序列与数据库中的鹿属动物线粒体DNA序列,确定样品中是否含有鹿属动物的DNA。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
PCR扩增试剂盒、DNA提取试剂盒、琼脂糖、DNA Marker等。
2.2 仪器
PCR扩增仪、电泳仪等。

3. 样品处理
3.1 样品的收集
从市场上购买的鹿鞭制品中取样,或者从鹿属动物的组织中取样。
3.2 DNA提取
按照DNA提取试剂盒的说明书进行操作,提取样品中的DNA。

4. PCR扩增
4.1 PCR反应体系
PCR反应体系如下表所示:

试剂 体积/质量

10×PCR缓冲液 2.5 μL
25 mM MgCl2 2.5 μL
2.5 mM dNTPs 1 μL
10 μM引物1 1 μL
10 μM引物2 1 μL
Taq DNA聚合酶 0.25 μL
DNA模板 1 μL
去离子水 16.75 μL
总体积 25 μL

4.2 PCR反应条件
PCR反应条件如下表所示:

步骤 温度 时间

初始变性 94℃ 5 min
变性 94℃ 30 s
退火 55℃ 30 s
延伸 72℃ 30 s
最终延伸 72℃ 10 min
保温 4℃ ∞

4.3 PCR产物检测
将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察PCR产物的大小和数量。

5. 结果判定
5.1 PCR产物大小
根据PCR产物的大小,判断样品中是否含有鹿属动物的DNA。
5.2 PCR产物序列比对
将PCR产物进行测序,将测序结果与数据库中的鹿属动物线粒体DNA序列进行比对,判断样品中是否含有鹿属动物的DNA。

6. 结论
根据PCR产物的大小和序列比对结果,判断样品中是否含有鹿属动物的DNA。

相关标准:
GB/T 5009.268-2016 食品中动物源性成分的检验 鹿肉
GB/T 5009.267-2016 食品中动物源性成分的检验 鹿茸
GB/T 5009.266-2016 食品中动物源性成分的检验 鹿骨
GB/T 5009.265-2016 食品中动物源性成分的检验 鹿筋
GB/T 5009.264-2016 食品中动物源性成分的检验 鹿尾