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紫穗玉米是一种特殊的玉米品种，其花青素含量较高，具有很高的营养价值和药用价值。因此，对紫穗玉米花青素的测定方法进行规范化是非常必要的。本标准采用分光光度法测定紫穗玉米花青素的含量，具有准确、简便、快速等优点。

1.范围
本标准适用于紫穗玉米花青素的测定。

2.仪器和试剂
2.1 仪器
分光光度计：可见分光光度计或紫外可见分光光度计。
比色皿：1 cm 光程石英比色皿。
2.2 试剂
乙醇：分析纯。
氯化铝：分析纯。
硫酸：分析纯。
苯酚：分析纯。
磷酸二氢钾：分析纯。
硫酸铵：分析纯。
乙酸钠：分析纯。
乙酸：分析纯。
乙醇：分析纯。

3.样品的制备
将紫穗玉米样品磨成粉末，过筛，取约 0.5 g 样品，加入 10 mL 乙醇，超声提取 30 min，离心 10 min，取上清液，用 0.45 μm 的滤膜过滤，即得样品溶液。

4.测定步骤
4.1 建立标准曲线
取 0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL 紫穗玉米花青素标准溶液，加入 10 mL 氯化铝-磷酸二氢钾缓冲液中，用 0.45 μm 的滤膜过滤，以氯化铝-磷酸二氢钾缓冲液为对照，分别测定吸光度，建立标准曲线。
4.2 测定样品
取 0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL 样品溶液，加入 10 mL 氯化铝-磷酸二氢钾缓冲液中，用 0.45 μm 的滤膜过滤，以氯化铝-磷酸二氢钾缓冲液为对照，分别测定吸光度。
4.3 计算样品中花青素的含量
根据标准曲线计算样品中花青素的含量。

相关标准：
GB/T 5009.28-2016 食品中花青素的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.29-2016 食品中花青素的测定 气相色谱法
GB/T 5009.30-2016 食品中花青素的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.31-2016 食品中花青素的测定 高效毛细管电泳法
GB/T 5009.32-2016 食品中花青素的测定 紫外分光光度法