DB22/T 2559-2016
牛新孢子虫病检测方法 LAMP法
发布时间:2016-12-01 实施时间:2017-03-01


牛新孢子虫病是一种由牛新孢子虫引起的传染病,主要通过食用被感染的牛肉或牛乳而传播。为了保障人民群众的食品安全,需要对牛新孢子虫病进行检测。本标准介绍了一种检测方法——LAMP法。

LAMP法(Loop-mediated isothermal amplification)是一种新型的核酸扩增技术,具有快速、简便、高灵敏度、高特异性等优点。本标准规定了LAMP法检测牛新孢子虫病的技术要求、试剂盒的组成、试验操作、结果判定和质量控制等内容。

技术要求:
1. 试剂盒应具有良好的特异性和灵敏度,能够检测出牛新孢子虫的DNA。
2. 试剂盒应包括LAMP反应体系所需的所有试剂和材料。
3. 试剂盒应具有良好的稳定性和重复性。

试剂盒的组成:
1. LAMP反应体系:包括LAMP酶、LAMP引物、dNTPs、Mg2+等。
2. 样品处理试剂:包括样品提取试剂和洗涤缓冲液等。
3. 检测试剂:包括探针、荧光素和荧光素抑制剂等。

试验操作:
1. 样品提取:将样品加入样品提取试剂中,离心后取上清液。
2. LAMP反应:将上清液加入LAMP反应体系中,进行LAMP反应。
3. 结果判定:根据荧光信号判断样品中是否存在牛新孢子虫的DNA。

结果判定:
1. 阳性:荧光信号明显,样品中存在牛新孢子虫的DNA。
2. 阴性:荧光信号不明显,样品中不存在牛新孢子虫的DNA。

质量控制:
1. 试剂盒应进行质量控制,确保试剂盒的稳定性和重复性。
2. 每批样品应设置阳性对照和阴性对照,确保检测结果的准确性和可靠性。

相关标准:
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 5009.3-2016 食品中病原微生物检验 检测方法
GB/T 22388-2008 食品安全国家标准 牛肉
GB/T 22389-2008 食品安全国家标准 牛乳
GB/T 22390-2008 食品安全国家标准 牛肉制品