DB22/T 2600-2016
梅花鹿、马鹿茸片鉴别方法 PCR法
发布时间:2016-12-22 实施时间:2017-04-01
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梅花鹿、马鹿茸片是中药材中常用的一种,但是由于市场上存在着一些假冒伪劣产品,因此需要对其进行鉴别。本标准采用PCR法进行鉴别,具体步骤如下:
1. 样品制备
将梅花鹿、马鹿茸片样品分别取1g,加入10mL的无菌水中,振荡混合,放置30min,离心10min,取上清液备用。
2. DNA提取
将上述上清液取1mL,加入1mL的DNA提取液中,振荡混合,放置5min,离心10min,取上清液备用。
3. PCR扩增
将上述上清液取1μL,加入PCR反应管中,加入PCR扩增液,进行PCR扩增。PCR扩增条件如下:95℃预变性5min,95℃变性30s,58℃退火30s,72℃延伸30s,共35个循环,72℃延伸10min,4℃保持。
4. PCR产物检测
将PCR产物取5μL,进行1%琼脂糖凝胶电泳,电泳条件如下:电压120V,电泳时间30min,取出凝胶,进行紫外线照射,观察PCR产物条带。
5. 结果判定
梅花鹿、马鹿茸片的PCR产物条带长度不同,可以通过条带长度进行鉴别。
相关标准:
GB/T 5009.124-2017 食品中动物源性成分的检验
GB/T 5009.227-2016 食品中DNA的检验
GB/T 22292-2008 中药材质量控制方法
GB/T 18779-2002 中药材鉴定规范
GB/T 20394-2006 中药材质量控制技术规范