DB22/T 2628-2017
鹅细小病毒检测 聚合酶链式反应(PCR)法
发布时间:2017-06-12 实施时间:2017-08-12


鹅细小病毒是一种常见的鹅病毒,能引起鹅的呼吸道、消化道等多种疾病。为了及时发现和控制鹅细小病毒的传播,需要对鹅进行定期检测。本标准提供了一种可靠的检测方法,即聚合酶链式反应(PCR)法。

1. 样品采集
样品采集应在鹅出现症状或疑似感染的情况下进行。采集的样品可以是鹅的血液、组织、粪便等。采集后应立即送至实验室进行处理。

2. 核酸提取
核酸提取是PCR检测的关键步骤。本标准推荐使用商用核酸提取试剂盒进行提取。提取后的核酸应在-20℃保存,避免反复冻融。

3. PCR反应体系
PCR反应体系包括PCR反应缓冲液、酶、引物、模板DNA等。本标准推荐使用商用PCR试剂盒,按照说明书中的方法进行反应体系的配置。

4. PCR反应程序
PCR反应程序包括预变性、变性、退火、延伸等步骤。本标准推荐使用以下PCR反应程序:
预变性:95℃,5min
变性:95℃,30s
退火:55℃,30s
延伸:72℃,30s
以上步骤重复30个循环,最后延伸10min。

5. 结果判定
PCR反应结束后,可以通过凝胶电泳等方法进行结果判定。阳性样品会出现特定大小的DNA条带,阴性样品则不会出现。

相关标准
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