DB22/T 973-2019
猪霉形体肺炎检测 ELISA法
发布时间:2019-07-25 实施时间:2019-08-15


猪霉形体肺炎是由猪霉形体引起的一种猪类传染病,严重影响了猪的生产和养殖。为了及时发现和控制猪霉形体肺炎的传播,需要对猪进行检测。本标准介绍了一种常用的检测方法——ELISA法。

1. 试剂
1.1 酶标板:96孔酶标板。
1.2 抗体:抗猪霉形体肺炎抗体。
1.3 酶标记二抗:HRP标记的抗猪IgG二抗。
1.4 底物:TMB底物。
1.5 停止液:2M H2SO4。

2. 设备
2.1 酶标仪:可测量450nm波长的酶标仪。
2.2 洗板机:可自动洗板的洗板机。

3. 操作方法
3.1 样品处理:将猪血清样品离心去除悬浮物,取上清液进行检测。
3.2 酶标板涂覆:将抗猪霉形体肺炎抗体稀释后涂覆在酶标板上,放置4℃过夜。
3.3 样品加标:将样品加标到酶标板中,加入酶标记二抗,孵育1小时。
3.4 洗板:用洗板机洗板3次。
3.5 底物反应:加入TMB底物,孵育30分钟。
3.6 停止反应:加入停止液停止反应。
3.7 测量:用酶标仪测量450nm波长下的吸光度值。

4. 结果判定
4.1 样品吸光度值与对照吸光度值比值(S/N值)大于等于2.1,为阳性。
4.2 S/N值小于2.1,为阴性。

相关标准:
GB/T 22470-2008 猪霉形体肺炎疫苗
GB/T 22471-2008 猪霉形体肺炎诊断试剂
GB/T 22472-2008 猪霉形体肺炎防治技术规范
GB/T 22473-2008 猪霉形体肺炎病原学检测方法
GB/T 22474-2008 猪霉形体肺炎临床诊断标准