DB22/T 2959-2018
荧光定量基因快速检测技术规程
发布时间:2018-12-26 实施时间:2019-01-30


荧光定量基因快速检测技术是一种快速、准确、灵敏的基因检测方法,广泛应用于医学、生物学、农业等领域。本标准旨在规范荧光定量基因快速检测技术的操作流程,确保检测结果的准确性和可靠性。

一、基本原理
荧光定量基因快速检测技术是利用荧光定量PCR技术,通过特异性引物和荧光探针扩增目标基因,同时检测荧光信号的强度,从而定量分析样品中目标基因的含量。

二、试剂盒的要求
试剂盒应包括PCR反应体系所需的所有试剂和材料,如引物、荧光探针、酶、缓冲液等。试剂盒应具有良好的稳定性和重复性,能够满足不同样品类型的检测需求。

三、设备的要求
设备应包括PCR仪、荧光定量仪等。PCR仪应具有高精度的温度控制系统和快速升温降温能力,能够满足PCR反应的要求。荧光定量仪应具有高灵敏度和高分辨率,能够准确检测荧光信号的强度。

四、操作步骤
操作步骤应包括样品处理、PCR反应、荧光定量等环节。样品处理应根据不同样品类型选择合适的方法,如提取DNA、RNA等。PCR反应应按照试剂盒说明书进行,包括反应体系的配制、PCR程序的设置等。荧光定量应根据荧光定量仪的说明进行,包括荧光信号的检测、数据分析等。

五、结果判定
结果判定应根据荧光信号的强度和阈值的比较进行,判断样品中目标基因的含量。结果应根据标准曲线进行定量分析,同时进行质量控制,确保结果的准确性和可靠性。

六、质量控制和报告
质量控制应包括实验室内部质量控制和外部质量控制。实验室内部质量控制应包括反应体系的优化、PCR程序的验证、荧光定量仪的校准等。外部质量控制应参加相关质量控制项目,如国家质量控制中心的质量控制项目等。报告应包括样品信息、检测结果、质量控制等内容,确保结果的可追溯性和可比性。

相关标准:
GB/T 21415-2008 荧光定量PCR检测技术规范
GB/T 21416-2008 荧光定量PCR检测试剂盒
GB/T 21417-2008 荧光定量PCR检测设备
GB/T 21418-2008 荧光定量PCR检测数据分析
GB/T 21419-2008 荧光定量PCR检测结果判定