DB22/T 2911-2018
贝类中副溶血性弧菌检测 微滴数字PCR法
发布时间:2018-11-12 实施时间:2018-12-30


副溶血性弧菌是一种常见的食源性病原菌,可引起人类食物中毒和感染。贝类是副溶血性弧菌的主要宿主之一,因此对贝类中副溶血性弧菌的检测具有重要意义。传统的检测方法包括培养和PCR等,但存在着检测时间长、灵敏度低等问题。微滴数字PCR技术是一种新兴的PCR检测方法,具有高灵敏度、高特异性、高通量等优点,已被广泛应用于食品安全领域。

本标准采用微滴数字PCR技术对贝类中副溶血性弧菌进行检测。具体操作步骤如下:

1. 样品制备:将贝类样品取1g,加入10ml PBS缓冲液中,振荡混合,离心沉淀,取上清液备用。

2. DNA提取:采用商用DNA提取试剂盒进行DNA提取,按照说明书操作。

3. 微滴数字PCR反应:将DNA样品加入微滴数字PCR芯片中,进行PCR扩增反应。反应体系和PCR程序根据芯片厂家提供的说明书进行设置。

4. 数据分析:将PCR扩增产生的荧光信号进行分析,根据阈值判断样品中是否存在副溶血性弧菌。

本标准要求检测结果的准确性、可重复性和可比性。为了保证检测结果的准确性,应在实验室内建立质量控制体系,定期进行质量控制。为了保证检测结果的可重复性和可比性,应在实验室内建立标准操作规程,并进行培训和考核。

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