DB22/T 2921-2018
禽白血病A/B/J亚群检测 PCR法
发布时间:2018-11-12 实施时间:2018-12-30


禽白血病是一种由禽白血病病毒引起的病毒性疾病,对家禽养殖业造成了严重的经济损失。禽白血病病毒分为A、B、C、D、E、J六个亚群,其中A、B、J亚群是我国主要流行的亚群。为了及时发现和控制禽白血病病毒的传播,需要对禽白血病病毒进行亚群检测。本标准规定了禽白血病A/B/J亚群检测PCR法的要求和方法。

1.范围
本标准适用于禽白血病病毒A/B/J亚群的检测。

2.试剂和材料
2.1 PCR试剂盒
2.2 禽白血病病毒A/B/J亚群特异性引物和探针
2.3 禽白血病病毒A/B/J亚群阳性对照
2.4 禽白血病病毒A/B/J亚群阴性对照
2.5 禽白血病病毒A/B/J亚群检测用样品

3.仪器设备
3.1 PCR仪
3.2 电泳仪
3.3 紫外分光光度计

4.方法
4.1 样品处理
将样品进行离心,取上清液进行检测。
4.2 PCR扩增
按照PCR试剂盒说明书进行PCR扩增,反应体系为25μL,反应条件为94℃预变性5min,94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸30s,共35个循环,最后72℃延伸10min。
4.3 PCR产物检测
将PCR产物进行电泳检测,检测结果通过紫外分光光度计进行分析。

5.结果判定
5.1 阳性判定
PCR扩增产物大小符合预期,且存在特异性条带,判定为阳性。
5.2 阴性判定
PCR扩增产物大小符合预期,但不存在特异性条带,判定为阴性。

6.结果报告
报告中应包括样品编号、检测日期、检测方法、检测结果等信息。

相关标准:
GB/T 22470-2008 禽白血病病毒检测方法
GB/T 22471-2008 禽白血病病毒血清学检测方法
GB/T 22472-2008 禽白血病病毒分离鉴定方法
GB/T 22473-2008 禽白血病病毒灭活疫苗检测方法
GB/T 22474-2008 禽白血病病毒活疫苗检测方法