DB22/T 3022-2019
家畜尿液中β-兴奋剂免疫胶体金法检测操作规程
发布时间:2019-05-27 实施时间:2019-06-17


β-兴奋剂是一类被广泛使用的禁药,对人体健康和动物生产安全都有很大的危害。因此,对于家畜尿液中β-兴奋剂的检测非常重要。本标准旨在规范家畜尿液中β-兴奋剂免疫胶体金法检测的操作流程,确保检测结果的准确性和可靠性。

1. 试剂和设备
1.1 试剂
本实验所需试剂包括:免疫胶体金试剂、样品处理试剂、洗涤缓冲液、稀释缓冲液、金溶液、硫酸、氯化钠等。
1.2 设备
本实验所需设备包括:离心管、离心机、移液器、微量吸管、比色皿、显微镜等。

2. 样品处理
2.1 样品采集
样品采集应在动物停药后的24小时内进行,采集时应避免污染和稀释。采集的样品应尽快送至实验室进行处理。
2.2 样品处理
将样品离心,取上清液,加入样品处理试剂,混匀后离心,取上清液即为处理后的样品。

3. 试剂配制
3.1 免疫胶体金试剂
将免疫胶体金试剂A、B按照比例混合,制成免疫胶体金试剂。
3.2 洗涤缓冲液
将洗涤缓冲液粉末加入适量的蒸馏水中,溶解后加入0.05%Tween-20,调节pH至7.4,制成洗涤缓冲液。
3.3 稀释缓冲液
将稀释缓冲液粉末加入适量的蒸馏水中,溶解后加入0.05%Tween-20,调节pH至7.4,制成稀释缓冲液。

4. 检测步骤
4.1 取比色皿,加入免疫胶体金试剂和处理后的样品,混匀后放置于室温下反应15分钟。
4.2 加入洗涤缓冲液,轻轻洗涤比色皿,倒掉洗涤液。
4.3 加入稀释缓冲液,混匀后放置于室温下反应5分钟。
4.4 加入金溶液,混匀后放置于室温下反应5分钟。
4.5 加入硫酸,混匀后放置于室温下反应5分钟。
4.6 加入氯化钠,混匀后放置于室温下反应5分钟。
4.7 观察比色皿中的颜色变化,如果出现红色或紫色,则说明样品中存在β-兴奋剂。

5. 结果判定
5.1 如果比色皿中出现红色或紫色,则说明样品中存在β-兴奋剂。
5.2 如果比色皿中未出现红色或紫色,则说明样品中不存在β-兴奋剂。

相关标准
GB/T 5009.199-2017 食品中β-兴奋剂的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 22542-2008 家畜尿液中β-兴奋剂的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 22541-2008 家畜尿液中β-兴奋剂的测定 酶联免疫吸附试验法
GB/T 22540-2008 家畜尿液中β-兴奋剂的测定 免疫荧光法
GB/T 22539-2008 家畜尿液中β-兴奋剂的测定 免疫层析法