DB22/T 3089-2019
羊传染性脓疱病毒检测 荧光PCR探针法
发布时间:2019-12-25 实施时间:2020-02-01


羊传染性脓疱病是一种由羊传染性脓疱病毒引起的急性、高度传染性疾病,主要危害羊、山羊等反刍动物。该病毒可引起口腔、鼻腔、眼部、乳房等部位的病变,严重时可导致死亡。因此,对羊传染性脓疱病的检测具有重要意义。

本标准采用荧光PCR探针法进行羊传染性脓疱病毒的检测。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速、准确等优点,可用于临床诊断、疫情监测等方面。

具体操作步骤如下:

1. 样品处理:将样品(组织、血液、分泌物等)收集于无菌条件下,避免污染。对于组织样品,应先进行机械破碎或离心等处理,使细胞破裂,释放病毒颗粒。

2. 核酸提取:采用商用核酸提取试剂盒进行核酸提取,按照说明书操作。提取后的核酸应保存于-20℃以下。

3. PCR反应:将提取的核酸加入PCR反应管中,加入荧光PCR探针、引物和PCR反应液,进行PCR扩增。PCR反应条件为:95℃预变性5min,95℃变性10s,60℃退火30s,共40个循环。

4. 结果判定:将PCR反应产物进行电泳分析,观察是否出现目标条带。同时,可使用荧光定量PCR仪进行定量分析,计算病毒载量。

本标准要求检测结果应具有可重复性、准确性和特异性。同时,还要求检测过程中应注意防止污染,避免假阳性结果的出现。

相关标准:
GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 检验和检疫标准
GB/T 22470.1-2008 食品安全国家标准 食品中基因改造成分的检测方法 第1部分:PCR方法
GB/T 22470.2-2008 食品安全国家标准 食品中基因改造成分的检测方法 第2部分:实时荧光定量PCR方法
GB/T 22470.3-2008 食品安全国家标准 食品中基因改造成分的检测方法 第3部分:酶联免疫吸附测定法
GB/T 22470.4-2008 食品安全国家标准 食品中基因改造成分的检测方法 第4部分:蛋白质检测法